生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2001年
1期
1-6
,共6页
沈义国%杜保兴%张劲松%陈受宜
瀋義國%杜保興%張勁鬆%陳受宜
침의국%두보흥%장경송%진수의
山菠菜%甜菜碱%胆碱单氧化物酶%盐胁迫
山菠菜%甜菜堿%膽堿單氧化物酶%鹽脅迫
산파채%첨채감%담감단양화물매%염협박
甜菜碱是一类广泛存在于生物体内的渗透保护剂.高等植物中,甜菜碱的生物合成经由胆碱→甜菜碱醛→甜菜碱两步反应完成,其中第一步反应,也是甜菜碱生物合成的限速反应,由胆碱单氧化物酶(CMO)催化.本研究以耐盐植物山菠菜(Atriplexhortensis)为材料构建了盐胁迫下的cDNA文库,用菠菜CMOcDNA为探针从中筛选获得一个长1.77kb的cDNA克隆,测序结果表明该克隆包含一个完整的开放读码框,编码一个由438个氨基酸构成的多肽,与菠菜和甜菜CMO的氨基酸序列同源性分别为81%和72%.同菠菜和甜菜中的CMO序列相比,山菠菜CMO基因(AhCMO)也具有保守的Rieske-Type[2Fe-2S]簇结合区和保守的多铁原子核结合域.对盐处理条件下山菠菜CMO基因转录水平的研究表明CMO基因在盐胁迫情况下表达量增加约3倍.将CMO与35S启动子连接后转化烟草(Nictianatabacumvar.Xanthi),获得了具有一定耐盐性状的转基因植株,在1.2%NaCl的盐浓度下生长良好.
甜菜堿是一類廣汎存在于生物體內的滲透保護劑.高等植物中,甜菜堿的生物閤成經由膽堿→甜菜堿醛→甜菜堿兩步反應完成,其中第一步反應,也是甜菜堿生物閤成的限速反應,由膽堿單氧化物酶(CMO)催化.本研究以耐鹽植物山菠菜(Atriplexhortensis)為材料構建瞭鹽脅迫下的cDNA文庫,用菠菜CMOcDNA為探針從中篩選穫得一箇長1.77kb的cDNA剋隆,測序結果錶明該剋隆包含一箇完整的開放讀碼框,編碼一箇由438箇氨基痠構成的多肽,與菠菜和甜菜CMO的氨基痠序列同源性分彆為81%和72%.同菠菜和甜菜中的CMO序列相比,山菠菜CMO基因(AhCMO)也具有保守的Rieske-Type[2Fe-2S]簇結閤區和保守的多鐵原子覈結閤域.對鹽處理條件下山菠菜CMO基因轉錄水平的研究錶明CMO基因在鹽脅迫情況下錶達量增加約3倍.將CMO與35S啟動子連接後轉化煙草(Nictianatabacumvar.Xanthi),穫得瞭具有一定耐鹽性狀的轉基因植株,在1.2%NaCl的鹽濃度下生長良好.
첨채감시일류엄범존재우생물체내적삼투보호제.고등식물중,첨채감적생물합성경유담감→첨채감철→첨채감량보반응완성,기중제일보반응,야시첨채감생물합성적한속반응,유담감단양화물매(CMO)최화.본연구이내염식물산파채(Atriplexhortensis)위재료구건료염협박하적cDNA문고,용파채CMOcDNA위탐침종중사선획득일개장1.77kb적cDNA극륭,측서결과표명해극륭포함일개완정적개방독마광,편마일개유438개안기산구성적다태,여파채화첨채CMO적안기산서렬동원성분별위81%화72%.동파채화첨채중적CMO서렬상비,산파채CMO기인(AhCMO)야구유보수적Rieske-Type[2Fe-2S]족결합구화보수적다철원자핵결합역.대염처리조건하산파채CMO기인전록수평적연구표명CMO기인재염협박정황하표체량증가약3배.장CMO여35S계동자련접후전화연초(Nictianatabacumvar.Xanthi),획득료구유일정내염성상적전기인식주,재1.2%NaCl적염농도하생장량호.
