同济医科大学学报
同濟醫科大學學報
동제의과대학학보
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAG TONGJI
2000年
4期
309-311,314
,共4页
促卵泡刺激素受体%竞争性PCR%半衰期
促卵泡刺激素受體%競爭性PCR%半衰期
촉란포자격소수체%경쟁성PCR%반쇠기
采用核酸酶保护测定(NPA)和定量反转录竞争性多聚酶链反应方法(RT-PCR),测定了表达重组促卵泡刺激素受体(FSHR)的转染细胞 (Y1)的FSHR mRNA的稳定性和半衰期.对照组FSHR mRNA量在8 h内保持恒定水平[NPA,(2 .9±0.3) pg/μg RNA; RT-PCR,(2.7±0.3) pg/μg RNA].用[3H]尿苷结合到RNA的方法,观察到Actinomycin D (ActD,5 μg/ml) 在1 h内可抑制mRNA合成达90%. 在ActD存在的条件下,FSHR mRNA量在1 h后出现一个时间依赖性的显著下降,用NPA测得的半衰期为(3.6±0.2) h,RT-PCR为(3.1±0.1) h.提示mRNA的降解速率在FSH R基因稳定表达维持上起着非常重要的作用.
採用覈痠酶保護測定(NPA)和定量反轉錄競爭性多聚酶鏈反應方法(RT-PCR),測定瞭錶達重組促卵泡刺激素受體(FSHR)的轉染細胞 (Y1)的FSHR mRNA的穩定性和半衰期.對照組FSHR mRNA量在8 h內保持恆定水平[NPA,(2 .9±0.3) pg/μg RNA; RT-PCR,(2.7±0.3) pg/μg RNA].用[3H]尿苷結閤到RNA的方法,觀察到Actinomycin D (ActD,5 μg/ml) 在1 h內可抑製mRNA閤成達90%. 在ActD存在的條件下,FSHR mRNA量在1 h後齣現一箇時間依賴性的顯著下降,用NPA測得的半衰期為(3.6±0.2) h,RT-PCR為(3.1±0.1) h.提示mRNA的降解速率在FSH R基因穩定錶達維持上起著非常重要的作用.
채용핵산매보호측정(NPA)화정량반전록경쟁성다취매련반응방법(RT-PCR),측정료표체중조촉란포자격소수체(FSHR)적전염세포 (Y1)적FSHR mRNA적은정성화반쇠기.대조조FSHR mRNA량재8 h내보지항정수평[NPA,(2 .9±0.3) pg/μg RNA; RT-PCR,(2.7±0.3) pg/μg RNA].용[3H]뇨감결합도RNA적방법,관찰도Actinomycin D (ActD,5 μg/ml) 재1 h내가억제mRNA합성체90%. 재ActD존재적조건하,FSHR mRNA량재1 h후출현일개시간의뢰성적현저하강,용NPA측득적반쇠기위(3.6±0.2) h,RT-PCR위(3.1±0.1) h.제시mRNA적강해속솔재FSH R기인은정표체유지상기착비상중요적작용.
