生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2000年
1期
13-16
,共4页
谢文凯%陈启宇%汪群斌%潘卫庆%颜日辉%陆德如
謝文凱%陳啟宇%汪群斌%潘衛慶%顏日輝%陸德如
사문개%진계우%왕군빈%반위경%안일휘%륙덕여
恶性疟原虫%DNA疫苗%四环素%抗体阳转率
噁性瘧原蟲%DNA疫苗%四環素%抗體暘轉率
악성학원충%DNA역묘%사배소%항체양전솔
将恶性疟原虫MSP1-31基因序列,引入四环素(Tc)控制的真核表达载体pTRE,获得重组质粒pTRE-31.将MSPl-31的原核表达载体pDS56T1转化大肠杆菌表达MSPl-31亲和纯化后作检测用抗原.pTRE-31与辅助质粒pTet-off(tTA)肌肉注射4周龄BALB/c小鼠,观察DNA介导免疫情况.结果显示,四环素饲喂的小鼠4周时血清抗体阳转率为7.1%(1/14),而不饲喂四环素组可达100%(14/14),表明用pTRL-31/pTet-off重组质粒组合直接注射小鼠有效地引发了针对疟原虫MSPl-31抗原的体液免疫反应,且可受控于四环素.不饲喂四环素组小鼠在12周后仍能维持抗体阳性,倍比稀释ELISA显示血清抗体滴度在4周、8周和12周内持续上升.饲喂四环素组小鼠4周后停止饲喂Tc,第8周和第12周检测仍有部分(60%)小鼠血清抗体阳转,而继续饲喂Tc的小鼠未有抗体阳转,暗示重组质粒DNA在小鼠体内可持续存在至少4周并仍具备表达功能.
將噁性瘧原蟲MSP1-31基因序列,引入四環素(Tc)控製的真覈錶達載體pTRE,穫得重組質粒pTRE-31.將MSPl-31的原覈錶達載體pDS56T1轉化大腸桿菌錶達MSPl-31親和純化後作檢測用抗原.pTRE-31與輔助質粒pTet-off(tTA)肌肉註射4週齡BALB/c小鼠,觀察DNA介導免疫情況.結果顯示,四環素飼餵的小鼠4週時血清抗體暘轉率為7.1%(1/14),而不飼餵四環素組可達100%(14/14),錶明用pTRL-31/pTet-off重組質粒組閤直接註射小鼠有效地引髮瞭針對瘧原蟲MSPl-31抗原的體液免疫反應,且可受控于四環素.不飼餵四環素組小鼠在12週後仍能維持抗體暘性,倍比稀釋ELISA顯示血清抗體滴度在4週、8週和12週內持續上升.飼餵四環素組小鼠4週後停止飼餵Tc,第8週和第12週檢測仍有部分(60%)小鼠血清抗體暘轉,而繼續飼餵Tc的小鼠未有抗體暘轉,暗示重組質粒DNA在小鼠體內可持續存在至少4週併仍具備錶達功能.
장악성학원충MSP1-31기인서렬,인입사배소(Tc)공제적진핵표체재체pTRE,획득중조질립pTRE-31.장MSPl-31적원핵표체재체pDS56T1전화대장간균표체MSPl-31친화순화후작검측용항원.pTRE-31여보조질립pTet-off(tTA)기육주사4주령BALB/c소서,관찰DNA개도면역정황.결과현시,사배소사위적소서4주시혈청항체양전솔위7.1%(1/14),이불사위사배소조가체100%(14/14),표명용pTRL-31/pTet-off중조질립조합직접주사소서유효지인발료침대학원충MSPl-31항원적체액면역반응,차가수공우사배소.불사위사배소조소서재12주후잉능유지항체양성,배비희석ELISA현시혈청항체적도재4주、8주화12주내지속상승.사위사배소조소서4주후정지사위Tc,제8주화제12주검측잉유부분(60%)소서혈청항체양전,이계속사위Tc적소서미유항체양전,암시중조질립DNA재소서체내가지속존재지소4주병잉구비표체공능.