病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2000年
2期
136-140
,共5页
王健伟%姜慧英%屈建国%赵同兴%洪涛
王健偉%薑慧英%屈建國%趙同興%洪濤
왕건위%강혜영%굴건국%조동흥%홍도
蓝舌病毒%结构蛋白%病毒样颗粒%装配%杆状病毒
藍舌病毒%結構蛋白%病毒樣顆粒%裝配%桿狀病毒
람설병독%결구단백%병독양과립%장배%간상병독
为研制蓝舌病毒(bluetongue virus,BTV)基因工程疫苗和进一步研究BTV结构与功能的关系,对BTV病毒样颗粒(VLP)的装配进行了研究.同时在昆虫细胞中表达BTV主要结构蛋白VP7、VP3、VP2与VP5,将细胞裂解液超速离心纯化后,发现主要存在两种形态的颗粒:一种与前文报道的病毒核心样颗粒(CLP)相同,直径约为60nm~70nm,蛋白壳厚10nm~15nm;另一种大小为70nm~80nm,蛋白壳厚20nm~30nm,与完整空心BTV颗粒形态一致.这些颗粒是由VP2/3、VP5与VP7组成的,不含核酸和其它任何BTV蛋白,并且具有诱导中和抗体的活性和血凝活性,与预期结果一致.以BTV13 VP7与VP3蛋白为内壳,以与其基因相比变异较大的BTV10 VP2、VP5为外壳,成功地实现了VLP装配,提示BTV颗粒内壳与外壳蛋白间相互作用引发装配的区域可能是保守的,VP2蛋白的高变性对其与内壳间的相互作用并无影响.
為研製藍舌病毒(bluetongue virus,BTV)基因工程疫苗和進一步研究BTV結構與功能的關繫,對BTV病毒樣顆粒(VLP)的裝配進行瞭研究.同時在昆蟲細胞中錶達BTV主要結構蛋白VP7、VP3、VP2與VP5,將細胞裂解液超速離心純化後,髮現主要存在兩種形態的顆粒:一種與前文報道的病毒覈心樣顆粒(CLP)相同,直徑約為60nm~70nm,蛋白殼厚10nm~15nm;另一種大小為70nm~80nm,蛋白殼厚20nm~30nm,與完整空心BTV顆粒形態一緻.這些顆粒是由VP2/3、VP5與VP7組成的,不含覈痠和其它任何BTV蛋白,併且具有誘導中和抗體的活性和血凝活性,與預期結果一緻.以BTV13 VP7與VP3蛋白為內殼,以與其基因相比變異較大的BTV10 VP2、VP5為外殼,成功地實現瞭VLP裝配,提示BTV顆粒內殼與外殼蛋白間相互作用引髮裝配的區域可能是保守的,VP2蛋白的高變性對其與內殼間的相互作用併無影響.
위연제람설병독(bluetongue virus,BTV)기인공정역묘화진일보연구BTV결구여공능적관계,대BTV병독양과립(VLP)적장배진행료연구.동시재곤충세포중표체BTV주요결구단백VP7、VP3、VP2여VP5,장세포렬해액초속리심순화후,발현주요존재량충형태적과립:일충여전문보도적병독핵심양과립(CLP)상동,직경약위60nm~70nm,단백각후10nm~15nm;령일충대소위70nm~80nm,단백각후20nm~30nm,여완정공심BTV과립형태일치.저사과립시유VP2/3、VP5여VP7조성적,불함핵산화기타임하BTV단백,병차구유유도중화항체적활성화혈응활성,여예기결과일치.이BTV13 VP7여VP3단백위내각,이여기기인상비변이교대적BTV10 VP2、VP5위외각,성공지실현료VLP장배,제시BTV과립내각여외각단백간상호작용인발장배적구역가능시보수적,VP2단백적고변성대기여내각간적상호작용병무영향.