热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2003年
1期
38-40
,共3页
陈建波%罗一鲁%谭守勇%冯蝶仪%曹智忠%刘志辉
陳建波%囉一魯%譚守勇%馮蝶儀%曹智忠%劉誌輝
진건파%라일로%담수용%풍접의%조지충%류지휘
结核分枝杆菌%抗原%ESAT6%Ag85B%MPT64%基因重组
結覈分枝桿菌%抗原%ESAT6%Ag85B%MPT64%基因重組
결핵분지간균%항원%ESAT6%Ag85B%MPT64%기인중조
目的克隆并构建编码结核分枝杆菌(MTB)ESAT6,Ag85B和MPT64分泌蛋白的重组表达质粒.方法采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中分别扩增出ESAT6,Ag85B和MPT64基因(288bp,978bp and 687bp),并克隆到T载体,然后用双内切酶消化后,与同样酶消化的pGEX-4T-2连接,转化大肠杆菌E.coli DH5α,阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定.结果酶切鉴定所切下的片段大小与预计相符,测序结果与文献报道一致,证实符合表达框架.结论成功地克隆并构建了ESAT6,Ag85B和MPT64基因的重组表达质粒pGEX-ESAT6,pGEX-Ag85B和pGEX-MPT64.
目的剋隆併構建編碼結覈分枝桿菌(MTB)ESAT6,Ag85B和MPT64分泌蛋白的重組錶達質粒.方法採用聚閤酶鏈反應(PCR)方法從結覈分枝桿菌H37Rv基因組DNA中分彆擴增齣ESAT6,Ag85B和MPT64基因(288bp,978bp and 687bp),併剋隆到T載體,然後用雙內切酶消化後,與同樣酶消化的pGEX-4T-2連接,轉化大腸桿菌E.coli DH5α,暘性剋隆用酶切和DNA測序鑒定.結果酶切鑒定所切下的片段大小與預計相符,測序結果與文獻報道一緻,證實符閤錶達框架.結論成功地剋隆併構建瞭ESAT6,Ag85B和MPT64基因的重組錶達質粒pGEX-ESAT6,pGEX-Ag85B和pGEX-MPT64.
목적극륭병구건편마결핵분지간균(MTB)ESAT6,Ag85B화MPT64분비단백적중조표체질립.방법채용취합매련반응(PCR)방법종결핵분지간균H37Rv기인조DNA중분별확증출ESAT6,Ag85B화MPT64기인(288bp,978bp and 687bp),병극륭도T재체,연후용쌍내절매소화후,여동양매소화적pGEX-4T-2련접,전화대장간균E.coli DH5α,양성극륭용매절화DNA측서감정.결과매절감정소절하적편단대소여예계상부,측서결과여문헌보도일치,증실부합표체광가.결론성공지극륭병구건료ESAT6,Ag85B화MPT64기인적중조표체질립pGEX-ESAT6,pGEX-Ag85B화pGEX-MPT64.
