泰山医学院学报
泰山醫學院學報
태산의학원학보
JOURNAL OF TAISHAN MEDICAL COLLEGE
2002年
4期
359-361
,共3页
侯佩强%祝庆余%吴劲松%艾宪淮%楚贻康%石长胜
侯珮彊%祝慶餘%吳勁鬆%艾憲淮%楚貽康%石長勝
후패강%축경여%오경송%애헌회%초이강%석장성
汉坦病毒%毕赤酵母%G2基因%表达%载体
漢坦病毒%畢赤酵母%G2基因%錶達%載體
한탄병독%필적효모%G2기인%표체%재체
目的研究汉坦病毒G2膜蛋白基因在甲醇营养型巴斯德毕赤酵母中的克隆表达.方法采用RT-PCR扩增G2基因,转化感受态大肠杆菌DH5α,DNA序列分析后,SnaBI、Not I两次酶切下G2,再连接到经同样酶切的pPIC9K表达载体上,构建表达载体pPIC9K-G2,Sal I线形化后电转化导入毕赤酵母宿主菌GS115,G418筛选转化子,1%甲醇诱导、摇瓶培养.结果序列分析表明,克隆序列与设计相符,12%SDS-PAGE显示重组蛋白为50KD,Westem-Blot证实其生物学活性.结论成功地在巴斯德毕赤酵母GS115中表达了汉坦病毒G2膜蛋白基因.
目的研究漢坦病毒G2膜蛋白基因在甲醇營養型巴斯德畢赤酵母中的剋隆錶達.方法採用RT-PCR擴增G2基因,轉化感受態大腸桿菌DH5α,DNA序列分析後,SnaBI、Not I兩次酶切下G2,再連接到經同樣酶切的pPIC9K錶達載體上,構建錶達載體pPIC9K-G2,Sal I線形化後電轉化導入畢赤酵母宿主菌GS115,G418篩選轉化子,1%甲醇誘導、搖瓶培養.結果序列分析錶明,剋隆序列與設計相符,12%SDS-PAGE顯示重組蛋白為50KD,Westem-Blot證實其生物學活性.結論成功地在巴斯德畢赤酵母GS115中錶達瞭漢坦病毒G2膜蛋白基因.
목적연구한탄병독G2막단백기인재갑순영양형파사덕필적효모중적극륭표체.방법채용RT-PCR확증G2기인,전화감수태대장간균DH5α,DNA서렬분석후,SnaBI、Not I량차매절하G2,재련접도경동양매절적pPIC9K표체재체상,구건표체재체pPIC9K-G2,Sal I선형화후전전화도입필적효모숙주균GS115,G418사선전화자,1%갑순유도、요병배양.결과서렬분석표명,극륭서렬여설계상부,12%SDS-PAGE현시중조단백위50KD,Westem-Blot증실기생물학활성.결론성공지재파사덕필적효모GS115중표체료한탄병독G2막단백기인.
