华东理工大学学报(自然科学版)
華東理工大學學報(自然科學版)
화동리공대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF EAST CHINA UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY
2002年
2期
161-163，215
,共4页
Kex2p%丝氨酸蛋白酶%前体加工酶%甲醇酵母
Kex2p%絲氨痠蛋白酶%前體加工酶%甲醇酵母
Kex2p%사안산단백매%전체가공매%갑순효모
通过PCR方法得到去除C端201个氨基酸残基(胞浆区,跨膜区和Ser/Thr丰富区)的Kex2p的DNA片段,并将该片段装载到质粒pPICZ-C中构建成表达质粒pPICZ-C-KEX2ΔCP.经过大肠杆菌(DH5α)的扩增,表达质粒被转入甲醇酵母(GS115)中,并得以分泌表达.发酵上清液中存在切割肽链中双碱性氨基酸C端的酶活力.SDS-PAGE电泳的结果证实了Kex2p的分泌表达,以及Kex2p在溶液中的自降解.
通過PCR方法得到去除C耑201箇氨基痠殘基(胞漿區,跨膜區和Ser/Thr豐富區)的Kex2p的DNA片段,併將該片段裝載到質粒pPICZ-C中構建成錶達質粒pPICZ-C-KEX2ΔCP.經過大腸桿菌(DH5α)的擴增,錶達質粒被轉入甲醇酵母(GS115)中,併得以分泌錶達.髮酵上清液中存在切割肽鏈中雙堿性氨基痠C耑的酶活力.SDS-PAGE電泳的結果證實瞭Kex2p的分泌錶達,以及Kex2p在溶液中的自降解.
통과PCR방법득도거제C단201개안기산잔기(포장구,과막구화Ser/Thr봉부구)적Kex2p적DNA편단,병장해편단장재도질립pPICZ-C중구건성표체질립pPICZ-C-KEX2ΔCP.경과대장간균(DH5α)적확증,표체질립피전입갑순효모(GS115)중,병득이분비표체.발효상청액중존재절할태련중쌍감성안기산C단적매활력.SDS-PAGE전영적결과증실료Kex2p적분비표체,이급Kex2p재용액중적자강해.
