CAJ | 학술논문

目的:以改进的银染RNA AP-PCR法分析原发性及转移性胃癌标本,鉴定和克隆胃癌转移相关基因.方法:以原发及转移灶胃癌标本总RNA为研究对象,首先以T12MN“锚定”引物进行逆转录合成cDNA第一链,再以10核苷酸任意引物进行PCR扩增,5%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物后银染显示并回收差异条带,经RNA点杂交验证、克隆测序后进入GenBank数据库检验同源性.结果:经银染RNA AP-PCR法分析,获得系列差异表达片段.对其中MGA1(662bp)和PGA1(589 bp)两个片段进行验证和测序,结果显示,MGA1与胃癌转移相关,并与编码人巨噬细胞集落刺激因子受体(macrophage colony-stimulating factor receptor,CSF-1R)的原癌基因c-fmns 100%同源;而PGA1则属胃癌转移抑制基因,与编码肿瘤转移抑制基因KAI-1完全同源.结论:银染RNA AP-PCR法适用于分析和克隆差异表达基因,具有快速、直观、假阳性率低等优点;提示CSF-1R及KAI-1与胃癌转移表型相关,为进一步研究CSF-1R功能提供了新的线索.
목적:이개진적은염RNA AP-PCR법분석원발성급전이성위암표본,감정화극륭위암전이상관기인.방법:이원발급전이조위암표본총RNA위연구대상,수선이T12MN“묘정”인물진행역전록합성cDNA제일련,재이10핵감산임의인물진행PCR확증,5%비변성취병희선알응효전영분리확증산물후은염현시병회수차이조대,경RNA점잡교험증、극륭측서후진입GenBank수거고검험동원성.결과:경은염RNA AP-PCR법분석,획득계렬차이표체편단.대기중MGA1(662bp)화PGA1(589 bp)량개편단진행험증화측서,결과현시,MGA1여위암전이상관,병여편마인거서세포집락자격인자수체(macrophage colony-stimulating factor receptor,CSF-1R)적원암기인c-fmns 100%동원;이PGA1칙속위암전이억제기인,여편마종류전이억제기인KAI-1완전동원.결론:은염RNA AP-PCR법괄용우분석화극륭차이표체기인,구유쾌속、직관、가양성솔저등우점;제시CSF-1R급KAI-1여위암전이표형상관,위진일보연구CSF-1R공능제공료신적선색.