浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大學學報（農業與生命科學版）
절강대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2005年
3期
277-282
,共6页
哀建国%邱英雄%余久华%陈小荣%丁炳扬
哀建國%邱英雄%餘久華%陳小榮%丁炳颺
애건국%구영웅%여구화%진소영%정병양
ISSR%优化%遗传变异%百山祖冷杉
ISSR%優化%遺傳變異%百山祖冷杉
ISSR%우화%유전변이%백산조랭삼
以百山祖冷杉DNA为材料,分析了DNA浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶的含量以及退火温度对ISSR-PCR扩增结果的影响,经过优化实验建立了百山祖冷杉ISSR-PCR最佳反应体系.25μL的PCR反应液含有的组分和终浓度分别为:约40 ng模板DNA,1.2 U Taq酶,0.4 μmol/L引物,1.5mmol/L MgCl2,0.2mmol/L dNTPs,2%去离子甲酰胺.利用优化反应体系从100个ISSR引物中,筛选出了13个稳定性高、重复性好的引物,对40个百山祖冷杉个体材料的DNA进行正式扩增,共扩增得到91条带,其中39条为多态性条带,多态位点百分率(PPB)为42.86%.百山祖冷杉的3个群体遗传多样性比较分析表明,人工辅助授粉产生的实生苗群体(PPB=37.36%)遗传多样性明显高于老树群体(PPB=16.48%)和嫁接苗群体(PPB＝20.88%),这说明了人工辅助授粉繁育措施能有效提高百山祖冷杉的遗传变异水平.
以百山祖冷杉DNA為材料,分析瞭DNA濃度、Mg2+濃度、dNTP濃度、Taq酶的含量以及退火溫度對ISSR-PCR擴增結果的影響,經過優化實驗建立瞭百山祖冷杉ISSR-PCR最佳反應體繫.25μL的PCR反應液含有的組分和終濃度分彆為:約40 ng模闆DNA,1.2 U Taq酶,0.4 μmol/L引物,1.5mmol/L MgCl2,0.2mmol/L dNTPs,2%去離子甲酰胺.利用優化反應體繫從100箇ISSR引物中,篩選齣瞭13箇穩定性高、重複性好的引物,對40箇百山祖冷杉箇體材料的DNA進行正式擴增,共擴增得到91條帶,其中39條為多態性條帶,多態位點百分率(PPB)為42.86%.百山祖冷杉的3箇群體遺傳多樣性比較分析錶明,人工輔助授粉產生的實生苗群體(PPB=37.36%)遺傳多樣性明顯高于老樹群體(PPB=16.48%)和嫁接苗群體(PPB＝20.88%),這說明瞭人工輔助授粉繁育措施能有效提高百山祖冷杉的遺傳變異水平.
이백산조랭삼DNA위재료,분석료DNA농도、Mg2+농도、dNTP농도、Taq매적함량이급퇴화온도대ISSR-PCR확증결과적영향,경과우화실험건립료백산조랭삼ISSR-PCR최가반응체계.25μL적PCR반응액함유적조분화종농도분별위:약40 ng모판DNA,1.2 U Taq매,0.4 μmol/L인물,1.5mmol/L MgCl2,0.2mmol/L dNTPs,2%거리자갑선알.이용우화반응체계종100개ISSR인물중,사선출료13개은정성고、중복성호적인물,대40개백산조랭삼개체재료적DNA진행정식확증,공확증득도91조대,기중39조위다태성조대,다태위점백분솔(PPB)위42.86%.백산조랭삼적3개군체유전다양성비교분석표명,인공보조수분산생적실생묘군체(PPB=37.36%)유전다양성명현고우로수군체(PPB=16.48%)화가접묘군체(PPB＝20.88%),저설명료인공보조수분번육조시능유효제고백산조랭삼적유전변이수평.
