军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2006年
6期
534-536
,共3页
杨慧盈%王慧%包士中%史晶%荫俊
楊慧盈%王慧%包士中%史晶%蔭俊
양혜영%왕혜%포사중%사정%음준
梭菌属神经毒素%PCR检测%特异性%灵敏度
梭菌屬神經毒素%PCR檢測%特異性%靈敏度
사균속신경독소%PCR검측%특이성%령민도
目的:建立梭菌属神经毒素基因快速鉴定和分型的PCR方法.方法:根据GenBank提供的肉毒毒素及破伤风毒素基因序列,综合应用多种生物学软件与在线分析平台,设计特异性及通用检测引物,对各型梭菌属毒素基因进行PCR扩增,验证扩增反应的特异性、通用性、灵敏度及重复性.结果与结论:设计了针对A,B,E,F型肉毒毒素、破伤风毒素基因轻链毒性活性区的5对特异引物,以及重链跨膜区和结合区的一对通用引物(BonAB-P01/P02,BonB-P01/P02,BonE-P01/P02,BonF-P01/P02,TET-P01/P02,TY-P01/P02).对各型神经毒素进行特异性扩增并在型间进行交叉实验,检测特异性良好,没有交叉反应;通用扩增结果显示均得到1 100 bp大小的条带.目前此检测方法灵敏度可达到(1～3)×103个菌.该检测方法特异性强,灵敏度高,可以用于梭菌属神经毒素基因的快速筛查与鉴定分型.
目的:建立梭菌屬神經毒素基因快速鑒定和分型的PCR方法.方法:根據GenBank提供的肉毒毒素及破傷風毒素基因序列,綜閤應用多種生物學軟件與在線分析平檯,設計特異性及通用檢測引物,對各型梭菌屬毒素基因進行PCR擴增,驗證擴增反應的特異性、通用性、靈敏度及重複性.結果與結論:設計瞭針對A,B,E,F型肉毒毒素、破傷風毒素基因輕鏈毒性活性區的5對特異引物,以及重鏈跨膜區和結閤區的一對通用引物(BonAB-P01/P02,BonB-P01/P02,BonE-P01/P02,BonF-P01/P02,TET-P01/P02,TY-P01/P02).對各型神經毒素進行特異性擴增併在型間進行交扠實驗,檢測特異性良好,沒有交扠反應;通用擴增結果顯示均得到1 100 bp大小的條帶.目前此檢測方法靈敏度可達到(1～3)×103箇菌.該檢測方法特異性彊,靈敏度高,可以用于梭菌屬神經毒素基因的快速篩查與鑒定分型.
목적:건립사균속신경독소기인쾌속감정화분형적PCR방법.방법:근거GenBank제공적육독독소급파상풍독소기인서렬,종합응용다충생물학연건여재선분석평태,설계특이성급통용검측인물,대각형사균속독소기인진행PCR확증,험증확증반응적특이성、통용성、령민도급중복성.결과여결론:설계료침대A,B,E,F형육독독소、파상풍독소기인경련독성활성구적5대특이인물,이급중련과막구화결합구적일대통용인물(BonAB-P01/P02,BonB-P01/P02,BonE-P01/P02,BonF-P01/P02,TET-P01/P02,TY-P01/P02).대각형신경독소진행특이성확증병재형간진행교차실험,검측특이성량호,몰유교차반응;통용확증결과현시균득도1 100 bp대소적조대.목전차검측방법령민도가체도(1～3)×103개균.해검측방법특이성강,령민도고,가이용우사균속신경독소기인적쾌속사사여감정분형.
