CAJ | 학술논문

目的:建立一种利用TaqMan荧光PCR定量技术不依赖参比内源基因测定转基因植物外源基因拷贝数的分析方法.方法:以转基因大豆RRS和转基因玉米Bt176为材料,通过转基因植物外源基因与品系特异序列拷贝数的比较测定外源基因整合拷贝数.结果:3次测得的Bt176玉米中Cry1A(b)基因的整合拷贝数分别为2.69,3.43和2.83,平均为2.98.标准偏差(SD)为0.40,相对标准偏差(RSD)为13.28%,即CrylA(b)基因在Bt176玉米中的整合拷贝数为3;3次测得的RRS大豆中EPSPS基因拷贝数分别为1.08,1.01,0.96,平均为1.01,SD为0.06,RSD为6.06%,即RRS大豆中EPSPS基因拷贝数的测定结果是单拷贝.结论:本研究建立的转基因植物外源基因拷贝数测定方法可准确测定转基因植物外源基因的拷贝数.与现有的通过外源基因与参比内源基因拷贝数比较测定转基因植物外源基因拷贝数的方法相比.不但避免了选择物种特异性的看家基因及测定看家基因拷贝数等大量工作,而且应用范围更广泛.
목적:건립일충이용TaqMan형광PCR정량기술불의뢰삼비내원기인측정전기인식물외원기인고패수적분석방법.방법:이전기인대두RRS화전기인옥미Bt176위재료,통과전기인식물외원기인여품계특이서렬고패수적비교측정외원기인정합고패수.결과:3차측득적Bt176옥미중Cry1A(b)기인적정합고패수분별위2.69,3.43화2.83,평균위2.98.표준편차(SD)위0.40,상대표준편차(RSD)위13.28%,즉CrylA(b)기인재Bt176옥미중적정합고패수위3;3차측득적RRS대두중EPSPS기인고패수분별위1.08,1.01,0.96,평균위1.01,SD위0.06,RSD위6.06%,즉RRS대두중EPSPS기인고패수적측정결과시단고패.결론:본연구건립적전기인식물외원기인고패수측정방법가준학측정전기인식물외원기인적고패수.여현유적통과외원기인여삼비내원기인고패수비교측정전기인식물외원기인고패수적방법상비.불단피면료선택물충특이성적간가기인급측정간가기인고패수등대량공작,이차응용범위경엄범.