高等学校化学学报
高等學校化學學報
고등학교화학학보
CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES
2008年
12期
2525-2530
,共6页
钙调蛋白%钙调蛋白结合蛋白%稀土%蛋白组学
鈣調蛋白%鈣調蛋白結閤蛋白%稀土%蛋白組學
개조단백%개조단백결합단백%희토%단백조학
应用固定化钙调蛋白(CaM)亲合色谱法、变性丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)等方法研究了La3+诱导CaM在大鼠脑匀浆液中的钙调蛋白亲合蛋白(CaMBP)谱以及CaM-CaMBP在模拟细胞环境下结合作用的La3+浓度依赖关系,并与Ca2+的作用进行了比较.实验结果表明,(1)La3+参与的CaMBP物种与Ca2+的基本相同.鉴定了其中含量高且稳定出现的5种CaMBP分别是参与糖酵解反应的6-磷酸果糖激酶和3-磷酸甘油醛脱氢酶、细胞骨架类的微管蛋白和肌动蛋白以及应激反应相关的71000热休克同源蛋白,表明稀土离子可能参与多种细胞过程;(2)La3+诱导CaM与5种CaMBP结合的浓度依赖曲线因CaMBP物种的不同而存在差别.热休克同源蛋白、肌动蛋白或微管蛋白对La3+相对敏感,La3+在金属-CaM-CaMBP三元体系中与CaM的结合常数K与Ca2+的相近或稍高;而6-磷酸果糖激酶和3-磷酸甘油醛脱氢酶体系对La3+的敏感性明显低于Ca2+.其原因可能在于模拟细胞环境的复杂性以及CaM-CaMBP蛋白质相互作用对金属离子与CaM配位结合的调节.
應用固定化鈣調蛋白(CaM)親閤色譜法、變性丙烯酰胺電泳(SDS-PAGE)和基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)等方法研究瞭La3+誘導CaM在大鼠腦勻漿液中的鈣調蛋白親閤蛋白(CaMBP)譜以及CaM-CaMBP在模擬細胞環境下結閤作用的La3+濃度依賴關繫,併與Ca2+的作用進行瞭比較.實驗結果錶明,(1)La3+參與的CaMBP物種與Ca2+的基本相同.鑒定瞭其中含量高且穩定齣現的5種CaMBP分彆是參與糖酵解反應的6-燐痠果糖激酶和3-燐痠甘油醛脫氫酶、細胞骨架類的微管蛋白和肌動蛋白以及應激反應相關的71000熱休剋同源蛋白,錶明稀土離子可能參與多種細胞過程;(2)La3+誘導CaM與5種CaMBP結閤的濃度依賴麯線因CaMBP物種的不同而存在差彆.熱休剋同源蛋白、肌動蛋白或微管蛋白對La3+相對敏感,La3+在金屬-CaM-CaMBP三元體繫中與CaM的結閤常數K與Ca2+的相近或稍高;而6-燐痠果糖激酶和3-燐痠甘油醛脫氫酶體繫對La3+的敏感性明顯低于Ca2+.其原因可能在于模擬細胞環境的複雜性以及CaM-CaMBP蛋白質相互作用對金屬離子與CaM配位結閤的調節.
응용고정화개조단백(CaM)친합색보법、변성병희선알전영(SDS-PAGE)화기질보조격광해석전리비행시간질보(MALDI-TOF-MS)등방법연구료La3+유도CaM재대서뇌균장액중적개조단백친합단백(CaMBP)보이급CaM-CaMBP재모의세포배경하결합작용적La3+농도의뢰관계,병여Ca2+적작용진행료비교.실험결과표명,(1)La3+삼여적CaMBP물충여Ca2+적기본상동.감정료기중함량고차은정출현적5충CaMBP분별시삼여당효해반응적6-린산과당격매화3-린산감유철탈경매、세포골가류적미관단백화기동단백이급응격반응상관적71000열휴극동원단백,표명희토리자가능삼여다충세포과정;(2)La3+유도CaM여5충CaMBP결합적농도의뢰곡선인CaMBP물충적불동이존재차별.열휴극동원단백、기동단백혹미관단백대La3+상대민감,La3+재금속-CaM-CaMBP삼원체계중여CaM적결합상수K여Ca2+적상근혹초고;이6-린산과당격매화3-린산감유철탈경매체계대La3+적민감성명현저우Ca2+.기원인가능재우모의세포배경적복잡성이급CaM-CaMBP단백질상호작용대금속리자여CaM배위결합적조절.
