河南大学学报（自然科学版）
河南大學學報（自然科學版）
하남대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HENAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2010年
6期
607-611
,共5页
冯爱芹%厉永强%王利枝%皇甫超申%张维娟%邓锦波%刘彬
馮愛芹%厲永彊%王利枝%皇甫超申%張維娟%鄧錦波%劉彬
풍애근%려영강%왕리지%황보초신%장유연%산금파%류빈
酒精%PC12细胞%凋亡%中性神经鞘磷脂酶
酒精%PC12細胞%凋亡%中性神經鞘燐脂酶
주정%PC12세포%조망%중성신경초린지매
采用不同浓度酒精处理PC12细胞,观察酒精诱导细胞凋亡作用及凋亡过程中中性神经鞘磷脂酶(neutral sphingomyelinase,N-SMase)活性及mRNA表达量的改变.结果显示,当酒精浓度达50 mmol/L 以上时,作用24 h后,去血清培养的PC12细胞表现出较强的细胞增殖抑制作用(P＜0.05)并呈浓度依赖性.Hoechst 33258荧光染色结果显示处理组凋亡细胞增多,表现染色质凝集、细胞核变小、核碎裂成碎片等典型细胞凋亡特征性变化.琼脂糖凝胶电泳显示酒精处理组有不同程度的DNA断裂,呈凋亡细胞典型的梯状DNA. RT-PCR结果显示,不同浓度酒精作用PC12细胞2 h后N-SMase表达升高.荧光分光光度法检测N-SMase的活性,显示酒精作用PC12细胞2 h后酶活性升高,与去血清对照组相比差异显著(P＜0.05).上述结果表明,酒精可导致PC12细胞凋亡并伴有N-SMase mRNA表达量增高,酶活性增强,说明酒精诱导PC12细胞凋亡与鞘磷脂循环有关.
採用不同濃度酒精處理PC12細胞,觀察酒精誘導細胞凋亡作用及凋亡過程中中性神經鞘燐脂酶(neutral sphingomyelinase,N-SMase)活性及mRNA錶達量的改變.結果顯示,噹酒精濃度達50 mmol/L 以上時,作用24 h後,去血清培養的PC12細胞錶現齣較彊的細胞增殖抑製作用(P＜0.05)併呈濃度依賴性.Hoechst 33258熒光染色結果顯示處理組凋亡細胞增多,錶現染色質凝集、細胞覈變小、覈碎裂成碎片等典型細胞凋亡特徵性變化.瓊脂糖凝膠電泳顯示酒精處理組有不同程度的DNA斷裂,呈凋亡細胞典型的梯狀DNA. RT-PCR結果顯示,不同濃度酒精作用PC12細胞2 h後N-SMase錶達升高.熒光分光光度法檢測N-SMase的活性,顯示酒精作用PC12細胞2 h後酶活性升高,與去血清對照組相比差異顯著(P＜0.05).上述結果錶明,酒精可導緻PC12細胞凋亡併伴有N-SMase mRNA錶達量增高,酶活性增彊,說明酒精誘導PC12細胞凋亡與鞘燐脂循環有關.
채용불동농도주정처리PC12세포,관찰주정유도세포조망작용급조망과정중중성신경초린지매(neutral sphingomyelinase,N-SMase)활성급mRNA표체량적개변.결과현시,당주정농도체50 mmol/L 이상시,작용24 h후,거혈청배양적PC12세포표현출교강적세포증식억제작용(P＜0.05)병정농도의뢰성.Hoechst 33258형광염색결과현시처리조조망세포증다,표현염색질응집、세포핵변소、핵쇄렬성쇄편등전형세포조망특정성변화.경지당응효전영현시주정처리조유불동정도적DNA단렬,정조망세포전형적제상DNA. RT-PCR결과현시,불동농도주정작용PC12세포2 h후N-SMase표체승고.형광분광광도법검측N-SMase적활성,현시주정작용PC12세포2 h후매활성승고,여거혈청대조조상비차이현저(P＜0.05).상술결과표명,주정가도치PC12세포조망병반유N-SMase mRNA표체량증고,매활성증강,설명주정유도PC12세포조망여초린지순배유관.
