四川动物
四川動物
사천동물
SICHUAN JOURNAL OF ZOOLOGY
2012年
3期
364-368
,共5页
褶纹冠蚌%α2-巨球蛋白%组织分布%原核表达
褶紋冠蚌%α2-巨毬蛋白%組織分佈%原覈錶達
습문관방%α2-거구단백%조직분포%원핵표체
α2-巨球蛋白(alpha-2 Macrogloblin,α2M)是存在于无脊椎动物和脊椎动物血浆中的一类广谱性蛋白酶抑制因子.本文利用RT-PCR方法分析了α2M基因mRNA在褶纹冠蚌不同组织的表达及在嗜水汽单胞菌刺激后褶纹冠蚌血细胞中的表达变化.结果表明,α2M仅在血细胞中有表达,而在外套膜、闭壳肌、肝胰腺和鳃组织中均无表达.注射嗜水气单胞菌6h、12 h、24h后,褶纹冠蚌血细胞中α2M的mRNA表达水平显著升高,表明o2M是褶纹冠蚌基础免疫系统中的重要组成部分.选择褶纹冠蚌α2M基因包含有受体结合区片段的第1369～ 1589氨基酸设计含有酶切位点的表达引物,构建重组表达质粒,经过IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE分析表达产物.结果表明重组的α2M在大肠杆菌Escherichia coli Rosetta-gami( DE3)中获得了表达,产物为40.8l KDa的融合蛋白.
α2-巨毬蛋白(alpha-2 Macrogloblin,α2M)是存在于無脊椎動物和脊椎動物血漿中的一類廣譜性蛋白酶抑製因子.本文利用RT-PCR方法分析瞭α2M基因mRNA在褶紋冠蚌不同組織的錶達及在嗜水汽單胞菌刺激後褶紋冠蚌血細胞中的錶達變化.結果錶明,α2M僅在血細胞中有錶達,而在外套膜、閉殼肌、肝胰腺和鰓組織中均無錶達.註射嗜水氣單胞菌6h、12 h、24h後,褶紋冠蚌血細胞中α2M的mRNA錶達水平顯著升高,錶明o2M是褶紋冠蚌基礎免疫繫統中的重要組成部分.選擇褶紋冠蚌α2M基因包含有受體結閤區片段的第1369～ 1589氨基痠設計含有酶切位點的錶達引物,構建重組錶達質粒,經過IPTG誘導錶達,利用SDS-PAGE分析錶達產物.結果錶明重組的α2M在大腸桿菌Escherichia coli Rosetta-gami( DE3)中穫得瞭錶達,產物為40.8l KDa的融閤蛋白.
α2-거구단백(alpha-2 Macrogloblin,α2M)시존재우무척추동물화척추동물혈장중적일류엄보성단백매억제인자.본문이용RT-PCR방법분석료α2M기인mRNA재습문관방불동조직적표체급재기수기단포균자격후습문관방혈세포중적표체변화.결과표명,α2M부재혈세포중유표체,이재외투막、폐각기、간이선화새조직중균무표체.주사기수기단포균6h、12 h、24h후,습문관방혈세포중α2M적mRNA표체수평현저승고,표명o2M시습문관방기출면역계통중적중요조성부분.선택습문관방α2M기인포함유수체결합구편단적제1369～ 1589안기산설계함유매절위점적표체인물,구건중조표체질립,경과IPTG유도표체,이용SDS-PAGE분석표체산물.결과표명중조적α2M재대장간균Escherichia coli Rosetta-gami( DE3)중획득료표체,산물위40.8l KDa적융합단백.
