中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
11期
34-38
,共5页
棘孢木霉%几丁质酶基因%表达%原核表达%蛋白质纯化%酶学性质
棘孢木黴%幾丁質酶基因%錶達%原覈錶達%蛋白質純化%酶學性質
극포목매%궤정질매기인%표체%원핵표체%단백질순화%매학성질
为高效表达几丁质酶基因tachi1,研究Tachi1的酶学性质.采用PCR技术从棘孢木霉中克隆了几丁质酶基因tachi1并与pEHisTEV原核表达载体融合,转化大肠杆菌BL21.经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了以包涵体形式高效表达的Tachi1.包涵体经洗涤、溶解、复性和纯化后获得了高纯度的Tachi1.复性后的Tachi1具有较高的几丁质酶活性,该几丁质酶反应的最适温度为50℃,最适pH 5.5.几丁质酶在30～35℃下稳定,在pH 3～7之间几丁质酶有较高活性.
為高效錶達幾丁質酶基因tachi1,研究Tachi1的酶學性質.採用PCR技術從棘孢木黴中剋隆瞭幾丁質酶基因tachi1併與pEHisTEV原覈錶達載體融閤,轉化大腸桿菌BL21.經異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導,穫得瞭以包涵體形式高效錶達的Tachi1.包涵體經洗滌、溶解、複性和純化後穫得瞭高純度的Tachi1.複性後的Tachi1具有較高的幾丁質酶活性,該幾丁質酶反應的最適溫度為50℃,最適pH 5.5.幾丁質酶在30～35℃下穩定,在pH 3～7之間幾丁質酶有較高活性.
위고효표체궤정질매기인tachi1,연구Tachi1적매학성질.채용PCR기술종극포목매중극륭료궤정질매기인tachi1병여pEHisTEV원핵표체재체융합,전화대장간균BL21.경이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도,획득료이포함체형식고효표체적Tachi1.포함체경세조、용해、복성화순화후획득료고순도적Tachi1.복성후적Tachi1구유교고적궤정질매활성,해궤정질매반응적최괄온도위50℃,최괄pH 5.5.궤정질매재30～35℃하은정,재pH 3～7지간궤정질매유교고활성.
