临床军医杂志
臨床軍醫雜誌
림상군의잡지
CLINICAL JOURNAL OF MEDICAL OFFICER
2002年
3期
1-4
,共4页
江志雄%金益人%洪文澜%尚世强%孙眉月
江誌雄%金益人%洪文瀾%尚世彊%孫眉月
강지웅%금익인%홍문란%상세강%손미월
脂多糖%新生儿%感染%白细胞介素-6%单核细胞
脂多糖%新生兒%感染%白細胞介素-6%單覈細胞
지다당%신생인%감염%백세포개소-6%단핵세포
目的新生儿感染导致机体严重病理变化的原因与内毒素有关,而内毒素的化学本质是脂多糖(LPS),通过观察LPS对新生儿脐血单核细胞(MNC)分泌IL-6及表达IL-6 mRNA基因的影响,探讨严重细菌感染时新生儿机体的防御反应机制.方法取肝素抗凝脐血,用密度离心分离法分离MNC,以RPMI 1640培养液调整细胞浓度为1×106/ml,将细胞悬液铺于24孔培养板上,依次加入不同浓度脂多糖(LPS)培养36 h或同一浓度LPS(1 μg/ml)培养不同时间,收集培养上清液及细胞,分别用ELISA和RT-PCR方法测定IL-6及IL-6 mRNA表达情况.结果 (1)脐血MNC在LPS刺激3,6,12,18,24,36 h后IL-6分泌水平逐步增高,6 h以后增加尤为明显,与其他各时间点比较有非常显著差异(P<0.001).LPS刺激组与无LPS对照组相同时间点比较,6 h内IL-6变化水平无差异,6 h以上各点有显著差异(P<0.01).RT-PCR方法检测显示LPS刺激后3 h即可见IL-6 mRNA基因表达.(2)脐血MNC受不同浓度LPS刺激时,IL-6分泌水平随LPS浓度递增.(3)全部脐血MNC均检测到IL-6 mRNA基因表达.结论 LPS能诱导新生儿脐血MNC IL-6 mRNA基因转录,从而促使IL-6合成、分泌,该作用呈时间、剂量依赖性变化.
目的新生兒感染導緻機體嚴重病理變化的原因與內毒素有關,而內毒素的化學本質是脂多糖(LPS),通過觀察LPS對新生兒臍血單覈細胞(MNC)分泌IL-6及錶達IL-6 mRNA基因的影響,探討嚴重細菌感染時新生兒機體的防禦反應機製.方法取肝素抗凝臍血,用密度離心分離法分離MNC,以RPMI 1640培養液調整細胞濃度為1×106/ml,將細胞懸液鋪于24孔培養闆上,依次加入不同濃度脂多糖(LPS)培養36 h或同一濃度LPS(1 μg/ml)培養不同時間,收集培養上清液及細胞,分彆用ELISA和RT-PCR方法測定IL-6及IL-6 mRNA錶達情況.結果 (1)臍血MNC在LPS刺激3,6,12,18,24,36 h後IL-6分泌水平逐步增高,6 h以後增加尤為明顯,與其他各時間點比較有非常顯著差異(P<0.001).LPS刺激組與無LPS對照組相同時間點比較,6 h內IL-6變化水平無差異,6 h以上各點有顯著差異(P<0.01).RT-PCR方法檢測顯示LPS刺激後3 h即可見IL-6 mRNA基因錶達.(2)臍血MNC受不同濃度LPS刺激時,IL-6分泌水平隨LPS濃度遞增.(3)全部臍血MNC均檢測到IL-6 mRNA基因錶達.結論 LPS能誘導新生兒臍血MNC IL-6 mRNA基因轉錄,從而促使IL-6閤成、分泌,該作用呈時間、劑量依賴性變化.
목적신생인감염도치궤체엄중병리변화적원인여내독소유관,이내독소적화학본질시지다당(LPS),통과관찰LPS대신생인제혈단핵세포(MNC)분비IL-6급표체IL-6 mRNA기인적영향,탐토엄중세균감염시신생인궤체적방어반응궤제.방법취간소항응제혈,용밀도리심분리법분리MNC,이RPMI 1640배양액조정세포농도위1×106/ml,장세포현액포우24공배양판상,의차가입불동농도지다당(LPS)배양36 h혹동일농도LPS(1 μg/ml)배양불동시간,수집배양상청액급세포,분별용ELISA화RT-PCR방법측정IL-6급IL-6 mRNA표체정황.결과 (1)제혈MNC재LPS자격3,6,12,18,24,36 h후IL-6분비수평축보증고,6 h이후증가우위명현,여기타각시간점비교유비상현저차이(P<0.001).LPS자격조여무LPS대조조상동시간점비교,6 h내IL-6변화수평무차이,6 h이상각점유현저차이(P<0.01).RT-PCR방법검측현시LPS자격후3 h즉가견IL-6 mRNA기인표체.(2)제혈MNC수불동농도LPS자격시,IL-6분비수평수LPS농도체증.(3)전부제혈MNC균검측도IL-6 mRNA기인표체.결론 LPS능유도신생인제혈MNC IL-6 mRNA기인전록,종이촉사IL-6합성、분비,해작용정시간、제량의뢰성변화.
