CAJ | 학술논문

2002～2003年从上海市和重庆市手足口病患儿的疱液标本中分离到10株病毒,其中上海9株,重庆1株.利用两对分别针对EV71和Cox.A16病毒VP1区的特异性引物,用RT-PCR方法对病毒进行初步鉴别.根据PCR所用引物及PCR扩增出的产物片段大小不同,可初步判定出EV71和Cox.A16病毒的血清型别.RT-PCR结果提示,上海分离到的9株病毒中,有2株为EV71,其余7株病毒为Cox.A16;重庆分离到的1株病毒为EV71.10株病毒的RT-PCR产物经序列测定和分析证实,PCR定型结果正确,说明PCR法具有很高的特异性,可作为EV71初步鉴定的首选方法.对所分离的3株EV71病毒进行VP1区编码基因全序列的测定和遗传学分析,通过同源性比较和构建系统发生树发现,此3株EV71病毒和中国大陆已发表的7株EV71病毒(SHZH03、SHZH98、SH-F1、SH-F2、SH-H25、SH-H26和CHN-87)全部属于C基因型,与该型代表株比较,同源性为89.3%～94.6%;与A、B基因型代表株比较,同源性为81.3%～84.0%,差异较大.在C基因型中,此3株EV71病毒和中国大陆先前分离的6株病毒(SHZH03、SHZH98、SH-F1、SH-F2、SH-H25、SH-H26)的同源性较高,在94.5%～100%范围内.在系统发生树上,这9株病毒形成一个较独立的分支.与CHN-87株的同源性在92.1%～93.6%之间.与已知的C1、C2、C3亚型代表株比较,同源性在89.3%～92.9%,差异≥7%,因此认为可将这9株病毒划分为C4亚型.上海、重庆和深圳的EV71病毒有较高的同源性,提示该病毒EV71-CA亚型在中国大陆1998～2003年间有较广泛的传播.建立中国流行的EV71病毒毒株库和基因库,对诊断、预防和控制EV71在中国的爆发有重要意义,对加强EV71的实验室诊断、病毒学监测和病毒基因型和亚型的标准命名和分子流行病学研究有重要帮助.
2002～2003년종상해시화중경시수족구병환인적포액표본중분리도10주병독,기중상해9주,중경1주.이용량대분별침대EV71화Cox.A16병독VP1구적특이성인물,용RT-PCR방법대병독진행초보감별.근거PCR소용인물급PCR확증출적산물편단대소불동,가초보판정출EV71화Cox.A16병독적혈청형별.RT-PCR결과제시,상해분리도적9주병독중,유2주위EV71,기여7주병독위Cox.A16;중경분리도적1주병독위EV71.10주병독적RT-PCR산물경서렬측정화분석증실,PCR정형결과정학,설명PCR법구유흔고적특이성,가작위EV71초보감정적수선방법.대소분리적3주EV71병독진행VP1구편마기인전서렬적측정화유전학분석,통과동원성비교화구건계통발생수발현,차3주EV71병독화중국대륙이발표적7주EV71병독(SHZH03、SHZH98、SH-F1、SH-F2、SH-H25、SH-H26화CHN-87)전부속우C기인형,여해형대표주비교,동원성위89.3%～94.6%;여A、B기인형대표주비교,동원성위81.3%～84.0%,차이교대.재C기인형중,차3주EV71병독화중국대륙선전분리적6주병독(SHZH03、SHZH98、SH-F1、SH-F2、SH-H25、SH-H26)적동원성교고,재94.5%～100%범위내.재계통발생수상,저9주병독형성일개교독립적분지.여CHN-87주적동원성재92.1%～93.6%지간.여이지적C1、C2、C3아형대표주비교,동원성재89.3%～92.9%,차이≥7%,인차인위가장저9주병독화분위C4아형.상해、중경화심수적EV71병독유교고적동원성,제시해병독EV71-CA아형재중국대륙1998～2003년간유교엄범적전파.건립중국류행적EV71병독독주고화기인고,대진단、예방화공제EV71재중국적폭발유중요의의,대가강EV71적실험실진단、병독학감측화병독기인형화아형적표준명명화분자류행병학연구유중요방조.