中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2005年
4期
294-296
,共3页
贾莉玮%吕茂民%徐斯日古楞%沈永才%于群%张亚东%章金刚
賈莉瑋%呂茂民%徐斯日古楞%瀋永纔%于群%張亞東%章金剛
가리위%려무민%서사일고릉%침영재%우군%장아동%장금강
人蛋白C%HEK293细胞%表达
人蛋白C%HEK293細胞%錶達
인단백C%HEK293세포%표체
目的获得转染人蛋白C cDNA的工程细胞株,实现重组蛋白C的表达.方法将构建好的重组表达载体pIRES-hPC用脂质体介导的方法转染HEK293细胞,经G418加压筛选、细胞有限稀释法等获得克隆细胞株,收集无血清培养上清,浓缩后进行鉴定.结果经G418筛选得到了21株克隆化细胞,SDS-PAGE和Western blot鉴定表明,表达产物含有人蛋白C,且具有抗凝活性.结论在哺乳动物细胞中已成功表达重组人蛋白C,为进一步深入研究及产业化奠定了基础.
目的穫得轉染人蛋白C cDNA的工程細胞株,實現重組蛋白C的錶達.方法將構建好的重組錶達載體pIRES-hPC用脂質體介導的方法轉染HEK293細胞,經G418加壓篩選、細胞有限稀釋法等穫得剋隆細胞株,收集無血清培養上清,濃縮後進行鑒定.結果經G418篩選得到瞭21株剋隆化細胞,SDS-PAGE和Western blot鑒定錶明,錶達產物含有人蛋白C,且具有抗凝活性.結論在哺乳動物細胞中已成功錶達重組人蛋白C,為進一步深入研究及產業化奠定瞭基礎.
목적획득전염인단백C cDNA적공정세포주,실현중조단백C적표체.방법장구건호적중조표체재체pIRES-hPC용지질체개도적방법전염HEK293세포,경G418가압사선、세포유한희석법등획득극륭세포주,수집무혈청배양상청,농축후진행감정.결과경G418사선득도료21주극륭화세포,SDS-PAGE화Western blot감정표명,표체산물함유인단백C,차구유항응활성.결론재포유동물세포중이성공표체중조인단백C,위진일보심입연구급산업화전정료기출.
