临床与实验病理学杂志
臨床與實驗病理學雜誌
림상여실험병이학잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL PATHOLOGY
2006年
4期
473-476
,共4页
吴园园%张利%肖继贤%朱晓钰%纪军%孙喜琢%张众
吳園園%張利%肖繼賢%硃曉鈺%紀軍%孫喜琢%張衆
오완완%장리%초계현%주효옥%기군%손희탁%장음
肿瘤抑制基因%PTEN基因%分子克隆%真核表达载体%转染
腫瘤抑製基因%PTEN基因%分子剋隆%真覈錶達載體%轉染
종류억제기인%PTEN기인%분자극륭%진핵표체재체%전염
目的 克隆人抑癌基因PTEN全长cDNA,构建其真核表达载体并检测其在人肝癌细胞HepG2中的表达.方法 采用RT-PCR法从人正常肝组织中扩增PTEN全长cDNA,将之与pMD18-T Simple Vector连接、测序, 获得PTEN基因.将该基因与pcDNA3.1(+)载体连接,构建pcDNA3.1-PTEN真核表达载体.用该载体转染HepG2细胞,RT-PCR检测PTEN的表达. 结果酶切和测序证实PTEN基因克隆和真核表达载体构建成功.HepG2-PTEN细胞中PTEN mRNA的表达显著高于未转染的HepG2细胞.结论 人抑癌基因PTEN在人肝癌细胞系HepG2细胞中能够高效、稳定地表达,为其在肝癌基因治疗研究中的应用奠定了基础.
目的 剋隆人抑癌基因PTEN全長cDNA,構建其真覈錶達載體併檢測其在人肝癌細胞HepG2中的錶達.方法 採用RT-PCR法從人正常肝組織中擴增PTEN全長cDNA,將之與pMD18-T Simple Vector連接、測序, 穫得PTEN基因.將該基因與pcDNA3.1(+)載體連接,構建pcDNA3.1-PTEN真覈錶達載體.用該載體轉染HepG2細胞,RT-PCR檢測PTEN的錶達. 結果酶切和測序證實PTEN基因剋隆和真覈錶達載體構建成功.HepG2-PTEN細胞中PTEN mRNA的錶達顯著高于未轉染的HepG2細胞.結論 人抑癌基因PTEN在人肝癌細胞繫HepG2細胞中能夠高效、穩定地錶達,為其在肝癌基因治療研究中的應用奠定瞭基礎.
목적 극륭인억암기인PTEN전장cDNA,구건기진핵표체재체병검측기재인간암세포HepG2중적표체.방법 채용RT-PCR법종인정상간조직중확증PTEN전장cDNA,장지여pMD18-T Simple Vector련접、측서, 획득PTEN기인.장해기인여pcDNA3.1(+)재체련접,구건pcDNA3.1-PTEN진핵표체재체.용해재체전염HepG2세포,RT-PCR검측PTEN적표체. 결과매절화측서증실PTEN기인극륭화진핵표체재체구건성공.HepG2-PTEN세포중PTEN mRNA적표체현저고우미전염적HepG2세포.결론 인억암기인PTEN재인간암세포계HepG2세포중능구고효、은정지표체,위기재간암기인치료연구중적응용전정료기출.
