中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2009年
5期
988-992
,共5页
徐波%邢丞%李敏%孙婉%崔景荣
徐波%邢丞%李敏%孫婉%崔景榮
서파%형승%리민%손완%최경영
蛋白酶体抑制剂%脂多糖类%细胞因子类
蛋白酶體抑製劑%脂多糖類%細胞因子類
단백매체억제제%지다당류%세포인자류
目的:探讨醛肽类蛋白酶体抑制剂MG132对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞Raw264.7 核转录因子-κB(NF-κB)活化、炎性因子一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法:利用报告基因检测法分析转染细胞(pNiFty-SEAP/HEK293)中NF-κB的活性;采用DAF-2DA荧光探针法检测Raw264.7细胞内NO的产生;蛋白免疫印迹法探讨细胞中iNOS和IκB-α蛋白表达情况;酶联免疫吸附法测定Raw264.7细胞上清中TNF-α的含量.结果:预先加入MG132能够显著抑制LPS诱导的TNF-α分泌,其抑制率由5 μmol/L时的36.7%升高到10 μmol/L时的60.4%.反映NO含量的荧光强度值随着MG132给药浓度的增加而降低,其抑制率从2 μmol/L时的29.5%达到10 μmol/L的55.9%.预刺激后MG132可使胞浆中iNOS蛋白表达减少,IκB-α蛋白却明显增加,NF-κB的活性随着给药浓度的升高而不断降低.结论:MG132能够抑制LPS诱导的TNF-α和NO的产生,减少iNOS表达,具有抗炎作用.其作用机制可能与IκB降解受阻,导致NF-κB活性降低有关.
目的:探討醛肽類蛋白酶體抑製劑MG132對脂多糖(LPS)誘導小鼠巨噬細胞Raw264.7 覈轉錄因子-κB(NF-κB)活化、炎性因子一氧化氮(NO)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)分泌以及誘導型一氧化氮閤酶(iNOS)錶達的影響.方法:利用報告基因檢測法分析轉染細胞(pNiFty-SEAP/HEK293)中NF-κB的活性;採用DAF-2DA熒光探針法檢測Raw264.7細胞內NO的產生;蛋白免疫印跡法探討細胞中iNOS和IκB-α蛋白錶達情況;酶聯免疫吸附法測定Raw264.7細胞上清中TNF-α的含量.結果:預先加入MG132能夠顯著抑製LPS誘導的TNF-α分泌,其抑製率由5 μmol/L時的36.7%升高到10 μmol/L時的60.4%.反映NO含量的熒光彊度值隨著MG132給藥濃度的增加而降低,其抑製率從2 μmol/L時的29.5%達到10 μmol/L的55.9%.預刺激後MG132可使胞漿中iNOS蛋白錶達減少,IκB-α蛋白卻明顯增加,NF-κB的活性隨著給藥濃度的升高而不斷降低.結論:MG132能夠抑製LPS誘導的TNF-α和NO的產生,減少iNOS錶達,具有抗炎作用.其作用機製可能與IκB降解受阻,導緻NF-κB活性降低有關.
목적:탐토철태류단백매체억제제MG132대지다당(LPS)유도소서거서세포Raw264.7 핵전록인자-κB(NF-κB)활화、염성인자일양화담(NO)화종류배사인자α(TNF-α)분비이급유도형일양화담합매(iNOS)표체적영향.방법:이용보고기인검측법분석전염세포(pNiFty-SEAP/HEK293)중NF-κB적활성;채용DAF-2DA형광탐침법검측Raw264.7세포내NO적산생;단백면역인적법탐토세포중iNOS화IκB-α단백표체정황;매련면역흡부법측정Raw264.7세포상청중TNF-α적함량.결과:예선가입MG132능구현저억제LPS유도적TNF-α분비,기억제솔유5 μmol/L시적36.7%승고도10 μmol/L시적60.4%.반영NO함량적형광강도치수착MG132급약농도적증가이강저,기억제솔종2 μmol/L시적29.5%체도10 μmol/L적55.9%.예자격후MG132가사포장중iNOS단백표체감소,IκB-α단백각명현증가,NF-κB적활성수착급약농도적승고이불단강저.결론:MG132능구억제LPS유도적TNF-α화NO적산생,감소iNOS표체,구유항염작용.기작용궤제가능여IκB강해수조,도치NF-κB활성강저유관.
