山羊瘤胃上皮细胞和空肠黏膜上皮细胞原代培养技术研究
산양류위상피세포화공장점막상피세포원대배양기술연구
Research on Primary Culture Method for Ruminal Epithelial and Jejunum Epithelial Cells of Goats
  • 万方数据
    动物营养学报 동물영양학보
    ACTA ZOONUTRIMENTA SINICA
    2010年 3期 602-610 ,共9页

    孙志洪%张庆丽%贺志雄%韩雪峰%谭支良%张恩平%汤少勋%周传社%王敏

    손지홍%장경려%하지웅%한설봉%담지량%장은평%탕소훈%주전사%왕민

    反刍动物%原代细胞培养%瘤胃%空肠%山羊 反芻動物%原代細胞培養%瘤胃%空腸%山羊
    반추동물%원대세포배양%류위%공장%산양
    本研究旨在建立山羊瘤胃上皮细胞(ruminal epithelium cell,REC)和空肠黏膜卜皮细胞(iejunum epithelial cell,JEC)的原代培养方法.首先进行胃肠道微生物去除的研究,设计9种不同种类和剂量的抗生素洗涤液,按随机区组原则冲洗采集到的瘤胃上皮和空肠黏膜.根据微生物去除试验结果,选择最佳种类和剂量的抗生素洗涤液对瘤胃上皮和空肠黏膜进行洗涤,然后采用不同的方法对REC和JMC进行分离与培养,根据分离所获的细胞特征以及细胞增殖活性结果确定适合山羊瘤胃上皮和空肠黏膜特性的分离方法.结果表明,为有效去除黏附的微生物,瘤胃上皮需分别经过5倍青链霉素和2倍庆大两性霉素洗涤液的冲洗,而空肠黏膜需分别经过5倍青链霉素和5倍庆大两性霉素洗涤液的冲洗.瘤胃上皮和空肠黏膜分别经2.50%胰蛋白酶+0.02%EDTA和0.20%Ⅳ型胶原酶+0.50 mmol/L CaCl2消化后可获得理想的细胞分离效果以及细胞增殖活性.本研究结果提示,根据胃肠道微生物的组成特征以及组织特性选择所确定的抗生素洗涤液以及组织细胞分离方法可用于山羊REC和JEC的原代培养.
    본연구지재건립산양류위상피세포(ruminal epithelium cell,REC)화공장점막복피세포(iejunum epithelial cell,JEC)적원대배양방법.수선진행위장도미생물거제적연구,설계9충불동충류화제량적항생소세조액,안수궤구조원칙충세채집도적류위상피화공장점막.근거미생물거제시험결과,선택최가충류화제량적항생소세조액대류위상피화공장점막진행세조,연후채용불동적방법대REC화JMC진행분리여배양,근거분리소획적세포특정이급세포증식활성결과학정괄합산양류위상피화공장점막특성적분리방법.결과표명,위유효거제점부적미생물,류위상피수분별경과5배청련매소화2배경대량성매소세조액적충세,이공장점막수분별경과5배청련매소화5배경대량성매소세조액적충세.류위상피화공장점막분별경2.50%이단백매+0.02%EDTA화0.20%Ⅳ형효원매+0.50 mmol/L CaCl2소화후가획득이상적세포분리효과이급세포증식활성.본연구결과제시,근거위장도미생물적조성특정이급조직특성선택소학정적항생소세조액이급조직세포분리방법가용우산양REC화JEC적원대배양.
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