微生物学免疫学进展
微生物學免疫學進展
미생물학면역학진전
PROGRESS IN MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2011年
3期
10-14
,共5页
寇桂英%包红%傅生芳%王名强%余黎%周旭
寇桂英%包紅%傅生芳%王名彊%餘黎%週旭
구계영%포홍%부생방%왕명강%여려%주욱
细胞工厂%Vero细胞%轮状病毒%病毒滴度
細胞工廠%Vero細胞%輪狀病毒%病毒滴度
세포공엄%Vero세포%륜상병독%병독적도
为了探索用细胞工厂代替转瓶培养轮状病毒基因重配株LD9及收获高滴度的LD9病毒原液和提高产量的可行性,分别在2层、4层细胞工厂和3L、15L转瓶培养Vero细胞,比较两种容器内细胞的生长状态.结果显示,以相同活细胞数2.5×104/ml同时接种两种不同培养容器时,细胞工厂培养3d已长成单层,而转瓶培养需5d;对两种容器长满单层时的细胞经胰酶消化后通过细胞仪计数、分析,结果显示,两种容器培养细胞长成单层时的单位面积细胞密度相当；对长成致密单层细胞的两种容器以相同的MOI( MOI =0.1)接种LD9病毒,转瓶培养的病毒于第8d病毒滴度达到高峰,为6.0～6.5 lgCCID50/ml；细胞工厂第5d病毒滴度达高峰,为6.5 lgCCID50/ml,并于第9d病毒滴度再次达到峰值,为6.0～6.5 lgCCID50/ml,实现二次收获病毒.
為瞭探索用細胞工廠代替轉瓶培養輪狀病毒基因重配株LD9及收穫高滴度的LD9病毒原液和提高產量的可行性,分彆在2層、4層細胞工廠和3L、15L轉瓶培養Vero細胞,比較兩種容器內細胞的生長狀態.結果顯示,以相同活細胞數2.5×104/ml同時接種兩種不同培養容器時,細胞工廠培養3d已長成單層,而轉瓶培養需5d;對兩種容器長滿單層時的細胞經胰酶消化後通過細胞儀計數、分析,結果顯示,兩種容器培養細胞長成單層時的單位麵積細胞密度相噹；對長成緻密單層細胞的兩種容器以相同的MOI( MOI =0.1)接種LD9病毒,轉瓶培養的病毒于第8d病毒滴度達到高峰,為6.0～6.5 lgCCID50/ml；細胞工廠第5d病毒滴度達高峰,為6.5 lgCCID50/ml,併于第9d病毒滴度再次達到峰值,為6.0～6.5 lgCCID50/ml,實現二次收穫病毒.
위료탐색용세포공엄대체전병배양륜상병독기인중배주LD9급수획고적도적LD9병독원액화제고산량적가행성,분별재2층、4층세포공엄화3L、15L전병배양Vero세포,비교량충용기내세포적생장상태.결과현시,이상동활세포수2.5×104/ml동시접충량충불동배양용기시,세포공엄배양3d이장성단층,이전병배양수5d;대량충용기장만단층시적세포경이매소화후통과세포의계수、분석,결과현시,량충용기배양세포장성단층시적단위면적세포밀도상당；대장성치밀단층세포적량충용기이상동적MOI( MOI =0.1)접충LD9병독,전병배양적병독우제8d병독적도체도고봉,위6.0～6.5 lgCCID50/ml；세포공엄제5d병독적도체고봉,위6.5 lgCCID50/ml,병우제9d병독적도재차체도봉치,위6.0～6.5 lgCCID50/ml,실현이차수획병독.
