中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2011年
8期
1508-1512
,共5页
符江琳%刘承云%徐晓%刘存飞%陈星霖
符江琳%劉承雲%徐曉%劉存飛%陳星霖
부강림%류승운%서효%류존비%진성림
生长停滞特异性蛋白6%缺氧复氧%H9c2细胞%PI3K/Akt通路%细胞凋亡
生長停滯特異性蛋白6%缺氧複氧%H9c2細胞%PI3K/Akt通路%細胞凋亡
생장정체특이성단백6%결양복양%H9c2세포%PI3K/Akt통로%세포조망
目的:观察外源性重组人生长停滞特异性蛋白6(Gas6)对缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞系凋亡的影响,并初步探讨其与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路的关系.方法:对体外培养的H9c2细胞进行缺氧复氧(3 h/3 h),模拟大鼠心肌缺血再灌注模型,将细胞随机分为4组:正常对照组(control组)、缺氧/复氧组(A/R组)、缺氧/复氧+ Gas6预处理组(A/R+Gas6组)及缺氧/复氧+ Gas6预处理+PI3K/Akt特异性阻断剂LY294002干预组(A/R+Gas6+LY294002组).分别采用MTT法检测心肌细胞活力,生化法检测细胞中caspase-3活性水平,Annexin V/PI 双染法及流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western免疫印迹法检测胞内磷酸化Akt(p-Akt)蛋白含量表达情况.结果:A/R组较control组细胞活力下降,caspase-3活性、凋亡率及p-Akt水平均较control组增加(P<0.05).但经Gas6预处理后,细胞活力及p-Akt表达水平较A/R组显著增加,caspase-3活性、凋亡率均减少(P<0.05),而Gas6的这些作用能被PI3K/Akt阻断剂抑制.结论:Gas6能减少缺氧复氧诱导的H9c2细胞凋亡,此作用机制可能是通过提高Akt磷酸化水平而激活PI3K/Akt通路实现的.
目的:觀察外源性重組人生長停滯特異性蛋白6(Gas6)對缺氧複氧誘導的H9c2心肌細胞繫凋亡的影響,併初步探討其與燐脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路的關繫.方法:對體外培養的H9c2細胞進行缺氧複氧(3 h/3 h),模擬大鼠心肌缺血再灌註模型,將細胞隨機分為4組:正常對照組(control組)、缺氧/複氧組(A/R組)、缺氧/複氧+ Gas6預處理組(A/R+Gas6組)及缺氧/複氧+ Gas6預處理+PI3K/Akt特異性阻斷劑LY294002榦預組(A/R+Gas6+LY294002組).分彆採用MTT法檢測心肌細胞活力,生化法檢測細胞中caspase-3活性水平,Annexin V/PI 雙染法及流式細胞儀檢測細胞凋亡率,Western免疫印跡法檢測胞內燐痠化Akt(p-Akt)蛋白含量錶達情況.結果:A/R組較control組細胞活力下降,caspase-3活性、凋亡率及p-Akt水平均較control組增加(P<0.05).但經Gas6預處理後,細胞活力及p-Akt錶達水平較A/R組顯著增加,caspase-3活性、凋亡率均減少(P<0.05),而Gas6的這些作用能被PI3K/Akt阻斷劑抑製.結論:Gas6能減少缺氧複氧誘導的H9c2細胞凋亡,此作用機製可能是通過提高Akt燐痠化水平而激活PI3K/Akt通路實現的.
목적:관찰외원성중조인생장정체특이성단백6(Gas6)대결양복양유도적H9c2심기세포계조망적영향,병초보탐토기여린지선기순3-격매/단백격매B(PI3K/Akt)통로적관계.방법:대체외배양적H9c2세포진행결양복양(3 h/3 h),모의대서심기결혈재관주모형,장세포수궤분위4조:정상대조조(control조)、결양/복양조(A/R조)、결양/복양+ Gas6예처리조(A/R+Gas6조)급결양/복양+ Gas6예처리+PI3K/Akt특이성조단제LY294002간예조(A/R+Gas6+LY294002조).분별채용MTT법검측심기세포활력,생화법검측세포중caspase-3활성수평,Annexin V/PI 쌍염법급류식세포의검측세포조망솔,Western면역인적법검측포내린산화Akt(p-Akt)단백함량표체정황.결과:A/R조교control조세포활력하강,caspase-3활성、조망솔급p-Akt수평균교control조증가(P<0.05).단경Gas6예처리후,세포활력급p-Akt표체수평교A/R조현저증가,caspase-3활성、조망솔균감소(P<0.05),이Gas6적저사작용능피PI3K/Akt조단제억제.결론:Gas6능감소결양복양유도적H9c2세포조망,차작용궤제가능시통과제고Akt린산화수평이격활PI3K/Akt통로실현적.
