浙江理工大学学报
浙江理工大學學報
절강리공대학학보
JOURNAL OF ZHEJIANG SCI-TECH UNIVERSITY
2012年
4期
604-608
,共5页
刘红彦%马国兴%杨力媛%郑洁%刘小川
劉紅彥%馬國興%楊力媛%鄭潔%劉小川
류홍언%마국흥%양력원%정길%류소천
西兰花%端粒酶分离%端粒酶检测%聚乙二醇(PEG)
西蘭花%耑粒酶分離%耑粒酶檢測%聚乙二醇(PEG)
서란화%단립매분리%단립매검측%취을이순(PEG)
植物端粒酶以自身的RNA亚基为模板,维持着染色体末端端粒的长度,从而使植物细胞可持续分裂.本研究以西兰花花蕾为材料,采用不同分子量、不同浓度的PEG分别提取端粒酶,根据PEG吸附蛋白质的原理,从具有端粒酶活性的组织中分离并富集端粒酶.结果显示:用PEG6000提取西兰花端粒酶,且用100 μg的酶量进行酶促反应时测得的端粒酶活性最高.以此为参数,经改进的TRAP法成功检测到:用0.2 g PEG6000/700μL洗脱液提取出的端粒酶活性很高.这些分离、检测技术为其它植物组织中端粒酶活性的检测和评价提供了新的途径,尤其对低活性的植物端粒酶检测具有重要意义,为深入研究端粒酶RNA的序列及结构奠定了基础.
植物耑粒酶以自身的RNA亞基為模闆,維持著染色體末耑耑粒的長度,從而使植物細胞可持續分裂.本研究以西蘭花花蕾為材料,採用不同分子量、不同濃度的PEG分彆提取耑粒酶,根據PEG吸附蛋白質的原理,從具有耑粒酶活性的組織中分離併富集耑粒酶.結果顯示:用PEG6000提取西蘭花耑粒酶,且用100 μg的酶量進行酶促反應時測得的耑粒酶活性最高.以此為參數,經改進的TRAP法成功檢測到:用0.2 g PEG6000/700μL洗脫液提取齣的耑粒酶活性很高.這些分離、檢測技術為其它植物組織中耑粒酶活性的檢測和評價提供瞭新的途徑,尤其對低活性的植物耑粒酶檢測具有重要意義,為深入研究耑粒酶RNA的序列及結構奠定瞭基礎.
식물단립매이자신적RNA아기위모판,유지착염색체말단단립적장도,종이사식물세포가지속분렬.본연구이서란화화뢰위재료,채용불동분자량、불동농도적PEG분별제취단립매,근거PEG흡부단백질적원리,종구유단립매활성적조직중분리병부집단립매.결과현시:용PEG6000제취서란화단립매,차용100 μg적매량진행매촉반응시측득적단립매활성최고.이차위삼수,경개진적TRAP법성공검측도:용0.2 g PEG6000/700μL세탈액제취출적단립매활성흔고.저사분리、검측기술위기타식물조직중단립매활성적검측화평개제공료신적도경,우기대저활성적식물단립매검측구유중요의의,위심입연구단립매RNA적서렬급결구전정료기출.