CAJ | 학술논문

目的探讨油酸对SW872前脂肪细胞的诱导分化作用,为体外研究脂肪细胞功能及其相关疾病建立细胞模型.方法体外培养,0.6 mmol/L油酸诱导SW872前脂肪细胞分化,光学显微镜观察SW872前脂肪细胞形态的变化,油红O染色观察胞浆中脂滴的聚集,化学比色法测定细胞中三酰甘油(TG)总量,RT-PCR方法检测不同分化时间点转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体-γ2 (PPAR-γ2)与CAAT/增强子结合蛋白-α(C/EBP-α) mRNA的时序性表达.结果 1.油酸诱导分化24 h时SW872前脂肪细胞胞体由小变大,形态由梭形变为圆形,胞浆中出现细小脂滴;诱导48 h时细胞体积进一步变大,几乎所有细胞形态变圆,胞浆中脂滴明显增多;诱导分化72 h时细胞呈戒环状,胞浆脂滴含量更多,油红O染色胞浆中可见丰富的脂肪染色.2.油酸诱导分化24 h时,细胞中TG总量增多;诱导分化48 h时TG总量是分化前8.5倍;诱导分化72 h时TG总量是分化前14倍(P＜0.01).3.油酸诱导分化24 h时PPAR-γ2与C/EBP-α mRNA表达轻度升高;诱导分化48 h时PPAR-γ2与C/EBP-α mRNA表达明显升高,分别是诱导分化前的10.23倍和12.91倍;诱导分化72 h时PPAR-γ2与C/EBP-α mRNA表达进一步升高,分别是诱导分化前的14.15倍和14.82倍(P均＜0.01).结论油酸刺激72 h能促进SW872前脂肪细胞中TG的合成与积聚,可诱导SW872前脂肪细胞中转录因子PPAR-γ2与C/EBP-α mRNA时序性表达,成功诱导SW872前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞.
목적탐토유산대SW872전지방세포적유도분화작용,위체외연구지방세포공능급기상관질병건립세포모형.방법체외배양,0.6 mmol/L유산유도SW872전지방세포분화,광학현미경관찰SW872전지방세포형태적변화,유홍O염색관찰포장중지적적취집,화학비색법측정세포중삼선감유(TG)총량,RT-PCR방법검측불동분화시간점전록인자과양화물매체증식물격활수체-γ2 (PPAR-γ2)여CAAT/증강자결합단백-α(C/EBP-α) mRNA적시서성표체.결과 1.유산유도분화24 h시SW872전지방세포포체유소변대,형태유사형변위원형,포장중출현세소지적;유도48 h시세포체적진일보변대,궤호소유세포형태변원,포장중지적명현증다;유도분화72 h시세포정계배상,포장지적함량경다,유홍O염색포장중가견봉부적지방염색.2.유산유도분화24 h시,세포중TG총량증다;유도분화48 h시TG총량시분화전8.5배;유도분화72 h시TG총량시분화전14배(P＜0.01).3.유산유도분화24 h시PPAR-γ2여C/EBP-α mRNA표체경도승고;유도분화48 h시PPAR-γ2여C/EBP-α mRNA표체명현승고,분별시유도분화전적10.23배화12.91배;유도분화72 h시PPAR-γ2여C/EBP-α mRNA표체진일보승고,분별시유도분화전적14.15배화14.82배(P균＜0.01).결론유산자격72 h능촉진SW872전지방세포중TG적합성여적취,가유도SW872전지방세포중전록인자PPAR-γ2여C/EBP-α mRNA시서성표체,성공유도SW872전지방세포분화위성숙지방세포.