CAJ | 학술논문

目的探讨胚胎心肌细胞移植重建心脏优势起搏点治疗缓慢型心律失常的可行性.方法酶法分离引产男性胎儿心房组织(包括窦房结),获取单个心肌细胞,差速贴壁法纯化,4、6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPl)标记后制备成5×106个/ml心肌细胞悬液,开胸直视下将1ml悬液注入Yorkshire猪左室游离壁(n=2),对照组(n=2)注入等体积培养基DMEM,移植前3天开始应用环孢素A(Ⅳ,5mg/kg/d)和泼尼松龙(Ⅳ,2.5mg/kg/d)抑制免疫排斥反应.移植后2～3周应用射频消融技术打断希氏束建立完全性房室传导阻滞动物模型,分别应用心电图、Holter、免疫荧光显像、心腔内起搏标测和激动标测进行组织学和电生理学评价,RT-PCR检测各组Y染色体SRYmRNA表达情况.结果希氏束消融后,两组动物均形成完全性房室传导阻滞,细胞移植组室性心律频率为75±30bpm,对照组为室性逸搏心律,频率为(35±10)次/min或交界心律,最后发生室颤死亡.心腔内起搏标测和激动标测证实细胞移植组室性心律起源于细胞注射表达.心脏组织冰冻切片可见DAPI标记的呈蓝色荧光的移植细胞核,移植细胞与宿主心肌细胞间有连结蛋白43(connexin43)和N型钙粘素(N-Cadherin)的表达,说明移植细胞存活并与宿主心肌细胞形成电一机械联系.RT-PCR检测到细胞移植组SRY基因片段区,对照组未扩增出SRY片段,说明胚胎心肌细胞在移植区存活.结论心肌细胞移植可能取代电子起搏器治疗缓慢型心律失常.
목적탐토배태심기세포이식중건심장우세기박점치료완만형심률실상적가행성.방법매법분리인산남성태인심방조직(포괄두방결),획취단개심기세포,차속첩벽법순화,4、6-이미기-2-분기신타(DAPl)표기후제비성5×106개/ml심기세포현액,개흉직시하장1ml현액주입Yorkshire저좌실유리벽(n=2),대조조(n=2)주입등체적배양기DMEM,이식전3천개시응용배포소A(Ⅳ,5mg/kg/d)화발니송룡(Ⅳ,2.5mg/kg/d)억제면역배척반응.이식후2～3주응용사빈소융기술타단희씨속건립완전성방실전도조체동물모형,분별응용심전도、Holter、면역형광현상、심강내기박표측화격동표측진행조직학화전생이학평개,RT-PCR검측각조Y염색체SRYmRNA표체정황.결과희씨속소융후,량조동물균형성완전성방실전도조체,세포이식조실성심률빈솔위75±30bpm,대조조위실성일박심률,빈솔위(35±10)차/min혹교계심률,최후발생실전사망.심강내기박표측화격동표측증실세포이식조실성심률기원우세포주사표체.심장조직빙동절편가견DAPI표기적정람색형광적이식세포핵,이식세포여숙주심기세포간유련결단백43(connexin43)화N형개점소(N-Cadherin)적표체,설명이식세포존활병여숙주심기세포형성전일궤계련계.RT-PCR검측도세포이식조SRY기인편단구,대조조미확증출SRY편단,설명배태심기세포재이식구존활.결론심기세포이식가능취대전자기박기치료완만형심률실상.