生态学报
生態學報
생태학보
ACTA ECOLOGICA SINICA
2002年
7期
1085-1090
,共6页
黄立南%周惠%陈月琴%罗硕%蓝崇钰%屈良鹄
黃立南%週惠%陳月琴%囉碩%藍崇鈺%屈良鵠
황립남%주혜%진월금%라석%람숭옥%굴량곡
垃圾渗滤液%古细菌%16S rRNA基因%ARDRA
垃圾滲濾液%古細菌%16S rRNA基因%ARDRA
랄급삼려액%고세균%16S rRNA기인%ARDRA
利用特异性的引物对,选择性扩增垃圾填埋场渗滤液中古细菌群落的16S rRNA基因片断,在此基础上建立16S rDNA克隆文库.经古细菌通用寡核苷酸探针的原位杂交筛选后,克隆文库内古细菌16S rDNA扩增片断的多样性通过ARDRA分析(amplified rDNA restriction analysis)而获得.利用PCR将各重组克隆子内的16S rDNA外源片断再扩增出来后,两种限制性内切酶-HhaⅠ和HaeⅢ-被分别用于16S rDNA克隆片断的限制酶切分析.结果表明,随机选出的70个古细菌16S rDNA克隆片断被分为21个不同的ARDRA型(组),其中的两个优势型总共占了所有被分析克隆子的60%,而其余19个型的相对丰度均处于较低的水平,当中的14个型更仅含有1个克隆子.通过对16S rRNA基因的PCR扩增、克隆及其ARDRA分析,能快速地获得有关垃圾填埋场渗滤液中古细菌群落的结构及其多样性的初步信息.
利用特異性的引物對,選擇性擴增垃圾填埋場滲濾液中古細菌群落的16S rRNA基因片斷,在此基礎上建立16S rDNA剋隆文庫.經古細菌通用寡覈苷痠探針的原位雜交篩選後,剋隆文庫內古細菌16S rDNA擴增片斷的多樣性通過ARDRA分析(amplified rDNA restriction analysis)而穫得.利用PCR將各重組剋隆子內的16S rDNA外源片斷再擴增齣來後,兩種限製性內切酶-HhaⅠ和HaeⅢ-被分彆用于16S rDNA剋隆片斷的限製酶切分析.結果錶明,隨機選齣的70箇古細菌16S rDNA剋隆片斷被分為21箇不同的ARDRA型(組),其中的兩箇優勢型總共佔瞭所有被分析剋隆子的60%,而其餘19箇型的相對豐度均處于較低的水平,噹中的14箇型更僅含有1箇剋隆子.通過對16S rRNA基因的PCR擴增、剋隆及其ARDRA分析,能快速地穫得有關垃圾填埋場滲濾液中古細菌群落的結構及其多樣性的初步信息.
이용특이성적인물대,선택성확증랄급전매장삼려액중고세균군락적16S rRNA기인편단,재차기출상건립16S rDNA극륭문고.경고세균통용과핵감산탐침적원위잡교사선후,극륭문고내고세균16S rDNA확증편단적다양성통과ARDRA분석(amplified rDNA restriction analysis)이획득.이용PCR장각중조극륭자내적16S rDNA외원편단재확증출래후,량충한제성내절매-HhaⅠ화HaeⅢ-피분별용우16S rDNA극륭편단적한제매절분석.결과표명,수궤선출적70개고세균16S rDNA극륭편단피분위21개불동적ARDRA형(조),기중적량개우세형총공점료소유피분석극륭자적60%,이기여19개형적상대봉도균처우교저적수평,당중적14개형경부함유1개극륭자.통과대16S rRNA기인적PCR확증、극륭급기ARDRA분석,능쾌속지획득유관랄급전매장삼려액중고세균군락적결구급기다양성적초보신식.
