江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2006年
2期
127-130
,共4页
李银%刘宇卓%张敬峰%沈永林%朱源励
李銀%劉宇卓%張敬峰%瀋永林%硃源勵
리은%류우탁%장경봉%침영림%주원려
H9亚型禽流感病毒%单克隆抗体%HI%生物学特性
H9亞型禽流感病毒%單剋隆抗體%HI%生物學特性
H9아형금류감병독%단극륭항체%HI%생물학특성
以灭活的H9亚型禽流感NJ01病毒株作为抗原,按常规方法免疫BALB/c鼠,最后一次免疫后第3 d取脾细胞与SP2/0细胞进行融合,采用HI进行筛选,检出18个阳性孔,阳性率为4.69%.对其中的3个阳性值较高的孔进行3次克隆,最终获得3株单克隆细胞,分别命名为1E1、2E10和3G2.通过与新城疫病毒、产蛋下降综合征病毒、H5亚型禽流感病毒进行HI试验,证明1E1、2E10和3G2分泌的抗体具有特异性.经连续1个月的体外培养和两次冻存复苏仍能稳定地分泌抗H9亚型禽流感HI抗体,3株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均为IgG1,杂交瘤细胞的染色体数目为92~108条,平均97条.杂交瘤细胞培养上清和腹水对H9亚型禽流感病毒的HI值分别为25~28和212~214,PD50分别10-2~10-1.67和10-4~10-3.33.单克隆抗体的制备为禽流感的快速诊断、预警预报和病毒的抗原性分析等奠定了基础.
以滅活的H9亞型禽流感NJ01病毒株作為抗原,按常規方法免疫BALB/c鼠,最後一次免疫後第3 d取脾細胞與SP2/0細胞進行融閤,採用HI進行篩選,檢齣18箇暘性孔,暘性率為4.69%.對其中的3箇暘性值較高的孔進行3次剋隆,最終穫得3株單剋隆細胞,分彆命名為1E1、2E10和3G2.通過與新城疫病毒、產蛋下降綜閤徵病毒、H5亞型禽流感病毒進行HI試驗,證明1E1、2E10和3G2分泌的抗體具有特異性.經連續1箇月的體外培養和兩次凍存複囌仍能穩定地分泌抗H9亞型禽流感HI抗體,3株雜交瘤細胞分泌的單剋隆抗體均為IgG1,雜交瘤細胞的染色體數目為92~108條,平均97條.雜交瘤細胞培養上清和腹水對H9亞型禽流感病毒的HI值分彆為25~28和212~214,PD50分彆10-2~10-1.67和10-4~10-3.33.單剋隆抗體的製備為禽流感的快速診斷、預警預報和病毒的抗原性分析等奠定瞭基礎.
이멸활적H9아형금류감NJ01병독주작위항원,안상규방법면역BALB/c서,최후일차면역후제3 d취비세포여SP2/0세포진행융합,채용HI진행사선,검출18개양성공,양성솔위4.69%.대기중적3개양성치교고적공진행3차극륭,최종획득3주단극륭세포,분별명명위1E1、2E10화3G2.통과여신성역병독、산단하강종합정병독、H5아형금류감병독진행HI시험,증명1E1、2E10화3G2분비적항체구유특이성.경련속1개월적체외배양화량차동존복소잉능은정지분비항H9아형금류감HI항체,3주잡교류세포분비적단극륭항체균위IgG1,잡교류세포적염색체수목위92~108조,평균97조.잡교류세포배양상청화복수대H9아형금류감병독적HI치분별위25~28화212~214,PD50분별10-2~10-1.67화10-4~10-3.33.단극륭항체적제비위금류감적쾌속진단、예경예보화병독적항원성분석등전정료기출.