生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2007年
1期
5-8
,共4页
何江峰%韩冰%郭慧琴%张占雄%赵雅丽
何江峰%韓冰%郭慧琴%張佔雄%趙雅麗
하강봉%한빙%곽혜금%장점웅%조아려
β-1,3-葡聚糖酶Ⅱ基因%RT-PCR%3'RACE%cDNA
β-1,3-葡聚糖酶Ⅱ基因%RT-PCR%3'RACE%cDNA
β-1,3-포취당매Ⅱ기인%RT-PCR%3'RACE%cDNA
实验利用3'-RACE技术进行燕麦β-1,3-葡聚糖酶Ⅱ(Oglc13Ⅱ)3'末端cDNA的快速扩增并进行序列分析.将0.01%的HgCl2诱导处理24h之后的燕麦(Avena Sativa)幼叶作为材料,利用RT-PCR技术得到Oglc13Ⅱ的部分cDNA片段,根据此片段设计一条特异性上游引物,反转录引物中的部分序列即3'sites Adaptor Primer作为下游引物,按3'RACE试剂盒(Takara)操作流程进行Oglc13Ⅱ3'末端cDNA的快速扩增,成功获取837bp的3'-RACE反应产物,通过BLAST技术,发现该片段与许多植物β-1,3-葡聚糖酶基因具有较高的相似性(50.0%～72.0%).因此认为成功克隆了Oglc13ⅡcDNA的3'末端序列.
實驗利用3'-RACE技術進行燕麥β-1,3-葡聚糖酶Ⅱ(Oglc13Ⅱ)3'末耑cDNA的快速擴增併進行序列分析.將0.01%的HgCl2誘導處理24h之後的燕麥(Avena Sativa)幼葉作為材料,利用RT-PCR技術得到Oglc13Ⅱ的部分cDNA片段,根據此片段設計一條特異性上遊引物,反轉錄引物中的部分序列即3'sites Adaptor Primer作為下遊引物,按3'RACE試劑盒(Takara)操作流程進行Oglc13Ⅱ3'末耑cDNA的快速擴增,成功穫取837bp的3'-RACE反應產物,通過BLAST技術,髮現該片段與許多植物β-1,3-葡聚糖酶基因具有較高的相似性(50.0%～72.0%).因此認為成功剋隆瞭Oglc13ⅡcDNA的3'末耑序列.
실험이용3'-RACE기술진행연맥β-1,3-포취당매Ⅱ(Oglc13Ⅱ)3'말단cDNA적쾌속확증병진행서렬분석.장0.01%적HgCl2유도처리24h지후적연맥(Avena Sativa)유협작위재료,이용RT-PCR기술득도Oglc13Ⅱ적부분cDNA편단,근거차편단설계일조특이성상유인물,반전록인물중적부분서렬즉3'sites Adaptor Primer작위하유인물,안3'RACE시제합(Takara)조작류정진행Oglc13Ⅱ3'말단cDNA적쾌속확증,성공획취837bp적3'-RACE반응산물,통과BLAST기술,발현해편단여허다식물β-1,3-포취당매기인구유교고적상사성(50.0%～72.0%).인차인위성공극륭료Oglc13ⅡcDNA적3'말단서렬.
