重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2007年
20期
2084-2085,插1-插2
,共3页
赵振国%彭家和%彭彦孟%鲁立%甘淋%何凤田%江渝
趙振國%彭傢和%彭彥孟%魯立%甘淋%何鳳田%江渝
조진국%팽가화%팽언맹%로립%감림%하봉전%강투
CD40L%原核表达%蛋白分离纯化
CD40L%原覈錶達%蛋白分離純化
CD40L%원핵표체%단백분리순화
目的将已构建好的重组表达质粒pET28a+-sCD40L进行优化条件表达,并将其目的蛋白纯化,对目的蛋白进行初步的活性分析.方法利用已构建好的重组表达质粒pET28a+-sCD40L进行目的蛋白的表达,优化表达的条件,利用Western-blot鉴定目的蛋白,在最适条件下进行目的蛋白的表达,利用Ni2+-NTA柱纯化目的蛋白,MTT法检测重组蛋白对人外周血淋巴细胞增殖活性的影响.结果利用 Ni2+-NTA柱将目的蛋白进行了分离纯化,且纯化的重组蛋白具有刺激人外周血淋巴细胞的增殖.结论成功优化了重组表达质粒pET28a+-sCD40L的表达条件,生物学活性的初步分析显示Ni2+-NTA柱纯化的重组蛋白具有刺激人外周血淋巴细胞增殖活性.
目的將已構建好的重組錶達質粒pET28a+-sCD40L進行優化條件錶達,併將其目的蛋白純化,對目的蛋白進行初步的活性分析.方法利用已構建好的重組錶達質粒pET28a+-sCD40L進行目的蛋白的錶達,優化錶達的條件,利用Western-blot鑒定目的蛋白,在最適條件下進行目的蛋白的錶達,利用Ni2+-NTA柱純化目的蛋白,MTT法檢測重組蛋白對人外週血淋巴細胞增殖活性的影響.結果利用 Ni2+-NTA柱將目的蛋白進行瞭分離純化,且純化的重組蛋白具有刺激人外週血淋巴細胞的增殖.結論成功優化瞭重組錶達質粒pET28a+-sCD40L的錶達條件,生物學活性的初步分析顯示Ni2+-NTA柱純化的重組蛋白具有刺激人外週血淋巴細胞增殖活性.
목적장이구건호적중조표체질립pET28a+-sCD40L진행우화조건표체,병장기목적단백순화,대목적단백진행초보적활성분석.방법이용이구건호적중조표체질립pET28a+-sCD40L진행목적단백적표체,우화표체적조건,이용Western-blot감정목적단백,재최괄조건하진행목적단백적표체,이용Ni2+-NTA주순화목적단백,MTT법검측중조단백대인외주혈림파세포증식활성적영향.결과이용 Ni2+-NTA주장목적단백진행료분리순화,차순화적중조단백구유자격인외주혈림파세포적증식.결론성공우화료중조표체질립pET28a+-sCD40L적표체조건,생물학활성적초보분석현시Ni2+-NTA주순화적중조단백구유자격인외주혈림파세포증식활성.
