遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2007年
10期
1237-1242
,共6页
程萱%翁土军%谭晓红%侯宁%王健%林福玉%黄培堂%杨晓
程萱%翁土軍%譚曉紅%侯寧%王健%林福玉%黃培堂%楊曉
정훤%옹토군%담효홍%후저%왕건%림복옥%황배당%양효
Cre%转基因小鼠%成骨细胞%显微注射
Cre%轉基因小鼠%成骨細胞%顯微註射
Cre%전기인소서%성골세포%현미주사
构建了含有骨钙素基因启动子、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体pOC-Cre,以显微注射的方法将4.6kb的转基因片段OC-Cre导入小鼠受精卵.16只子代小鼠中经PCR和Southern杂交鉴定,有2只小鼠携带外源基因,整合率为12.5%.为了检测OC-Cre在转基因小鼠中表达的组织特异性,将转基因首建者小鼠与基因组上携带有LoxP位点的条件性Smad4基因敲除小鼠交配,PCR结果显示,仅在子代纯合型小鼠骨组织基因组中扩增出了Cre介导重组后的片段.将OC-Cre转基因小鼠与ROSA26报告小鼠交配,利用LacZ染色对双转基因阳性子代小鼠进行检测,结果显示Cre重组酶在成骨细胞中特异性表达并介导ROSA基因座LoxP位点间的重组.所有这些结果说明:所建立的OC-Cre转基因小鼠在成骨细胞中特异性表达Cre重组酶,并能在体内介导成骨细胞基因组上LoxP位点间的重组,是一种理想的研制成骨细胞特异性基因敲除小鼠的工具小鼠.
構建瞭含有骨鈣素基因啟動子、Cre重組酶基因和人生長激素基因polyA的轉基因載體pOC-Cre,以顯微註射的方法將4.6kb的轉基因片段OC-Cre導入小鼠受精卵.16隻子代小鼠中經PCR和Southern雜交鑒定,有2隻小鼠攜帶外源基因,整閤率為12.5%.為瞭檢測OC-Cre在轉基因小鼠中錶達的組織特異性,將轉基因首建者小鼠與基因組上攜帶有LoxP位點的條件性Smad4基因敲除小鼠交配,PCR結果顯示,僅在子代純閤型小鼠骨組織基因組中擴增齣瞭Cre介導重組後的片段.將OC-Cre轉基因小鼠與ROSA26報告小鼠交配,利用LacZ染色對雙轉基因暘性子代小鼠進行檢測,結果顯示Cre重組酶在成骨細胞中特異性錶達併介導ROSA基因座LoxP位點間的重組.所有這些結果說明:所建立的OC-Cre轉基因小鼠在成骨細胞中特異性錶達Cre重組酶,併能在體內介導成骨細胞基因組上LoxP位點間的重組,是一種理想的研製成骨細胞特異性基因敲除小鼠的工具小鼠.
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