CAJ | 학술논문

目的:许旺细胞作为种子细胞在组织工程化人工神经制备中的作用已被学术界所接受.胎兔的神经系统已发育完善,而免疫系统尚未成熟,探讨将胎兔许旺细胞植入去细胞同种异体神经桥接体制备组织工程化人工神经修复周围神经缺损的可行性.方法:实验于2005-03/2006-03在河北医科大学第三医院完成.①实验材料:SPF级怀孕28 d的新西兰白兔2只、成年新西兰白兔1只.②实验过程:包括胎兔许旺细胞培养、去细胞神经桥接体的制备以及许旺细胞与去细胞神经桥接体的体外种植3个步骤.使用双酶消化法培养许旺细胞并将其种植于经3%TritonX-100作用96 h后的同种异体神经中.③实验评估:分别于培养的1,3,5 d通过石蜡切片苏木精-伊红染色观察许旺细胞在桥接体中的生长情况.结果:①采用双差速贴壁法去除绝大部分成纤维细胞后在细胞培养的初期使用阿糖胞苷抑制成纤维细胞生长,后期培养液中加入神经生长冈子促进许旺细胞牛长能获取大量许旺细胞且纯度可达90%以上.②用3%Triton X-100作用96 h可去除周围神经中的细胞和髓鞘而保留完整的神经基底膜管和纤维支架结构,并且对神经基底膜主要成分一层粘连蛋白无明显影响.③采用胎兔坐骨神经培养的许旺细胞能在用成年兔坐骨神经制备的去细胞桥神经接体中生长良好,并且有迁移成行的特性.结论:种植许旺细胞重新细胞化的去细胞同种异体神经将可能成为一种理想的组织工程化人工神经.
목적:허왕세포작위충자세포재조직공정화인공신경제비중적작용이피학술계소접수.태토적신경계통이발육완선,이면역계통상미성숙,탐토장태토허왕세포식입거세포동충이체신경교접체제비조직공정화인공신경수복주위신경결손적가행성.방법:실험우2005-03/2006-03재하북의과대학제삼의원완성.①실험재료:SPF급부잉28 d적신서란백토2지、성년신서란백토1지.②실험과정:포괄태토허왕세포배양、거세포신경교접체적제비이급허왕세포여거세포신경교접체적체외충식3개보취.사용쌍매소화법배양허왕세포병장기충식우경3%TritonX-100작용96 h후적동충이체신경중.③실험평고:분별우배양적1,3,5 d통과석사절편소목정-이홍염색관찰허왕세포재교접체중적생장정황.결과:①채용쌍차속첩벽법거제절대부분성섬유세포후재세포배양적초기사용아당포감억제성섬유세포생장,후기배양액중가입신경생장강자촉진허왕세포우장능획취대량허왕세포차순도가체90%이상.②용3%Triton X-100작용96 h가거제주위신경중적세포화수초이보류완정적신경기저막관화섬유지가결구,병차대신경기저막주요성분일층점련단백무명현영향.③채용태토좌골신경배양적허왕세포능재용성년토좌골신경제비적거세포교신경접체중생장량호,병차유천이성행적특성.결론:충식허왕세포중신세포화적거세포동충이체신경장가능성위일충이상적조직공정화인공신경.