CAJ | 학술논문

目的:建立可表达随机12肽库的逆转录病毒表达系统.方法:体外合成编码随机12肽的DNA片段;在最优化的实验参数和反应条件下将DNA片段克隆入带有EGFP标记的逆转录病毒载体后分批次电击转化大肠杆菌,合并转化所得菌液即为可表达随机12肽库的逆转录病毒原始载体库;半固体扩增法扩增该原始载体库,提取质粒并转染GP2-293包装细胞.在EGFP表达最强的时间点收集细胞培养上清,即为可表达随机12肽库的逆转录病毒库.结果:可表达随机12肽库的逆转录病毒原始载体库的库容量为3.14×106 cfu;扩增后的逆转录病毒载体库滴度为5.2×109 cfu/mL,库容量为2.34×1011cfu;转染了已扩增的载体库质粒后的GP2-293包装细胞可以成功地表达随机12肽库.结论:建立了可表达随机12肽库的逆转录病毒表达系统,为抗病毒寡肽的筛选以及进一步的深入研究奠定了良好的基础.
목적:건립가표체수궤12태고적역전록병독표체계통.방법:체외합성편마수궤12태적DNA편단;재최우화적실험삼수화반응조건하장DNA편단극륭입대유EGFP표기적역전록병독재체후분비차전격전화대장간균,합병전화소득균액즉위가표체수궤12태고적역전록병독원시재체고;반고체확증법확증해원시재체고,제취질립병전염GP2-293포장세포.재EGFP표체최강적시간점수집세포배양상청,즉위가표체수궤12태고적역전록병독고.결과:가표체수궤12태고적역전록병독원시재체고적고용량위3.14×106 cfu;확증후적역전록병독재체고적도위5.2×109 cfu/mL,고용량위2.34×1011cfu;전염료이확증적재체고질립후적GP2-293포장세포가이성공지표체수궤12태고.결론:건립료가표체수궤12태고적역전록병독표체계통,위항병독과태적사선이급진일보적심입연구전정료량호적기출.