中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2008年
6期
1293-1298
,共6页
陈楠楠%黄世林%向阳%张励%张晨%张德杰%王伟%马茉娇%刘小宇%尤婷玉
陳楠楠%黃世林%嚮暘%張勵%張晨%張德傑%王偉%馬茉嬌%劉小宇%尤婷玉
진남남%황세림%향양%장려%장신%장덕걸%왕위%마말교%류소우%우정옥
PUVA%HL-60细胞%细胞凋亡%线粒体跨膜电位%Fas%FasL%caspase8%caspase3
PUVA%HL-60細胞%細胞凋亡%線粒體跨膜電位%Fas%FasL%caspase8%caspase3
PUVA%HL-60세포%세포조망%선립체과막전위%Fas%FasL%caspase8%caspase3
本研究探讨中药补骨脂素(psoralen,PSO)加长波紫外线A(ultraviolet A,UVA)(PUVA)诱导人白血病细胞HL-60凋亡的作用及其可能的作用机制.采用MTT法观察PUVA对HL-60细胞增殖的影响;采用电子显微镜技术观察细胞超微结构改变;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率、线粒体跨膜电位水平以及细胞Fas、FasL蛋白的表达;荧光定量PCR技术检测细胞Fas、FazL mRNA的表达;免疫细胞化学法(immunocytochemistry,ICC)检测caspase8、caspase 3蛋白的表达.结果表明,PUVA可抑制HL-60细胞的增殖,使凋亡率增加,作用呈时间、浓度依赖性;UVA照射时间15分钟和PSO浓度为80μg/ml 时,HL-60细胞增殖的抑制率、凋亡率达峰值;PUVA作用后HL-60细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变,细胞线粒体跨膜电位水平下降;PUVA作用4小时Fas mRNA的表达升高,FasL mRNA的表达下降;PUVA作用24小时Fas、FasL在蛋白水平的表达亦呈现相同规律;PUVA可使HL-60细胞caspase 8、caspase 3蛋白的表达增强,在作用后8小时强度达峰值.结论:PUVA能够抑制HL-60细胞的增殖.并诱导其凋亡,可能的机制是PUVA作用于Fas/FasL 系统,使Fas基因表达升高、FasL基因表达下降,激活下游caspase 8、caspase 3的表达,线粒体膜电位水平降低亦可能参与了这个过程.
本研究探討中藥補骨脂素(psoralen,PSO)加長波紫外線A(ultraviolet A,UVA)(PUVA)誘導人白血病細胞HL-60凋亡的作用及其可能的作用機製.採用MTT法觀察PUVA對HL-60細胞增殖的影響;採用電子顯微鏡技術觀察細胞超微結構改變;流式細胞術(FCM)檢測細胞凋亡率、線粒體跨膜電位水平以及細胞Fas、FasL蛋白的錶達;熒光定量PCR技術檢測細胞Fas、FazL mRNA的錶達;免疫細胞化學法(immunocytochemistry,ICC)檢測caspase8、caspase 3蛋白的錶達.結果錶明,PUVA可抑製HL-60細胞的增殖,使凋亡率增加,作用呈時間、濃度依賴性;UVA照射時間15分鐘和PSO濃度為80μg/ml 時,HL-60細胞增殖的抑製率、凋亡率達峰值;PUVA作用後HL-60細胞超微結構齣現明顯的凋亡形態學改變,細胞線粒體跨膜電位水平下降;PUVA作用4小時Fas mRNA的錶達升高,FasL mRNA的錶達下降;PUVA作用24小時Fas、FasL在蛋白水平的錶達亦呈現相同規律;PUVA可使HL-60細胞caspase 8、caspase 3蛋白的錶達增彊,在作用後8小時彊度達峰值.結論:PUVA能夠抑製HL-60細胞的增殖.併誘導其凋亡,可能的機製是PUVA作用于Fas/FasL 繫統,使Fas基因錶達升高、FasL基因錶達下降,激活下遊caspase 8、caspase 3的錶達,線粒體膜電位水平降低亦可能參與瞭這箇過程.
본연구탐토중약보골지소(psoralen,PSO)가장파자외선A(ultraviolet A,UVA)(PUVA)유도인백혈병세포HL-60조망적작용급기가능적작용궤제.채용MTT법관찰PUVA대HL-60세포증식적영향;채용전자현미경기술관찰세포초미결구개변;류식세포술(FCM)검측세포조망솔、선립체과막전위수평이급세포Fas、FasL단백적표체;형광정량PCR기술검측세포Fas、FazL mRNA적표체;면역세포화학법(immunocytochemistry,ICC)검측caspase8、caspase 3단백적표체.결과표명,PUVA가억제HL-60세포적증식,사조망솔증가,작용정시간、농도의뢰성;UVA조사시간15분종화PSO농도위80μg/ml 시,HL-60세포증식적억제솔、조망솔체봉치;PUVA작용후HL-60세포초미결구출현명현적조망형태학개변,세포선립체과막전위수평하강;PUVA작용4소시Fas mRNA적표체승고,FasL mRNA적표체하강;PUVA작용24소시Fas、FasL재단백수평적표체역정현상동규률;PUVA가사HL-60세포caspase 8、caspase 3단백적표체증강,재작용후8소시강도체봉치.결론:PUVA능구억제HL-60세포적증식.병유도기조망,가능적궤제시PUVA작용우Fas/FasL 계통,사Fas기인표체승고、FasL기인표체하강,격활하유caspase 8、caspase 3적표체,선립체막전위수평강저역가능삼여료저개과정.
