东南大学学报（医学版）
東南大學學報（醫學版）
동남대학학보（의학판）
JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2009年
5期
366-370
,共5页
孟凡岩%沈传来%郭薇%缪凤琴%谢维%张建琼
孟凡巖%瀋傳來%郭薇%繆鳳琴%謝維%張建瓊
맹범암%침전래%곽미%무봉금%사유%장건경
β2-微球蛋白%癌胚抗原%稀释复性法%HLA-肽复合体
β2-微毬蛋白%癌胚抗原%稀釋複性法%HLA-肽複閤體
β2-미구단백%암배항원%희석복성법%HLA-태복합체
目的: 获得大量CEA694-702-β2-微球蛋白(β2m)融合蛋白,并制备HLA-CEA694-702复合体.方法: 通过引物设计在β2m基因的5′端引入CEA694-702序列和Linker序列,并将目的基因克隆到质粒pET28a中,在BL21(DE3)中表达.CEA694-702-β2m和HLA重链蛋白用金属螯合亲和层析法进行纯化,并经稀释复性法复性.制备的HLA-CEA694-702复合体用PEG20000浓缩,应用ELISA鉴定其构象,并用尺寸排阻色谱纯化和鉴定.结果: HLA重链蛋白和CEA694-702-β2m蛋白经金属螯合亲和层析法纯化后纯度提高.ELISA鉴定结果表明稀释复性后HLA-CEA694-702复合体形成了正确的构象.利用尺寸排阻色谱对HLA-CEA694-702复合体成功地进行了纯化.结论: 利用CEA694-702-β2m融合蛋白成功制备出HLA-CEA694-702复合体,为HLA-CEA694-702四聚体的制备奠定了基础.
目的: 穫得大量CEA694-702-β2-微毬蛋白(β2m)融閤蛋白,併製備HLA-CEA694-702複閤體.方法: 通過引物設計在β2m基因的5′耑引入CEA694-702序列和Linker序列,併將目的基因剋隆到質粒pET28a中,在BL21(DE3)中錶達.CEA694-702-β2m和HLA重鏈蛋白用金屬螯閤親和層析法進行純化,併經稀釋複性法複性.製備的HLA-CEA694-702複閤體用PEG20000濃縮,應用ELISA鑒定其構象,併用呎吋排阻色譜純化和鑒定.結果: HLA重鏈蛋白和CEA694-702-β2m蛋白經金屬螯閤親和層析法純化後純度提高.ELISA鑒定結果錶明稀釋複性後HLA-CEA694-702複閤體形成瞭正確的構象.利用呎吋排阻色譜對HLA-CEA694-702複閤體成功地進行瞭純化.結論: 利用CEA694-702-β2m融閤蛋白成功製備齣HLA-CEA694-702複閤體,為HLA-CEA694-702四聚體的製備奠定瞭基礎.
목적: 획득대량CEA694-702-β2-미구단백(β2m)융합단백,병제비HLA-CEA694-702복합체.방법: 통과인물설계재β2m기인적5′단인입CEA694-702서렬화Linker서렬,병장목적기인극륭도질립pET28a중,재BL21(DE3)중표체.CEA694-702-β2m화HLA중련단백용금속오합친화층석법진행순화,병경희석복성법복성.제비적HLA-CEA694-702복합체용PEG20000농축,응용ELISA감정기구상,병용척촌배조색보순화화감정.결과: HLA중련단백화CEA694-702-β2m단백경금속오합친화층석법순화후순도제고.ELISA감정결과표명희석복성후HLA-CEA694-702복합체형성료정학적구상.이용척촌배조색보대HLA-CEA694-702복합체성공지진행료순화.결론: 이용CEA694-702-β2m융합단백성공제비출HLA-CEA694-702복합체,위HLA-CEA694-702사취체적제비전정료기출.
