CAJ | 학술논문

背景:目前用作组织工程椎间盘研究的种子细胞主要来源于体外培养的髓核细胞,而体外培养的髓核细胞传至一定代次后即出现老化现象,老化的细胞失去生长能力不适于组织工程研究.目的:比较不同代次正常髓核细胞的形态学、增殖特性以及细胞的主要细胞外基质成分基因表达情况.方法:以酶消化法分离、培养人正常椎间盘髓核细胞,对不同代次髓核细胞采用光镜、电镜等形态学方法进行大体形态和超微结构观察,采用XTT实验检测不同代次细胞间的生长动力学差异,测定髓核细胞的活力和细胞Ⅱ型胶原及糖胺多糖mRNA表达.结果与结论:传3代之前细胞形态饱满,胞浆丰富,细胞呈多角形、短梭形,细胞内细胞器丰富,形态正常,线粒体含量少,核糖体含量多,说明细胞代谢旺盛,增殖能力强,生长曲线和XTT实验也提示传3代之前髓核细胞活性高,增殖能力强,细胞活力高,细胞外基质分泌旺盛.从传4代起,部分细胞形态逐渐向长梭形演化,逐渐表现为成纤维细胞的形态,说明细胞开始出现"返祖"现象,也称为老化现象,细胞的生长趋缓,传六七代后细胞均表现为长梭形,粗面内质网扩张,线粒体增多,细胞活力降低,细胞外基质明显减少,生长处于停滞状态.实验结果提示,体外培养条件下,人髓核细胞前3代细胞形态良好,增殖能力强,适合作为组织工程椎间盘的种子细胞,而细胞传4代后增殖能力逐渐减弱,不宜作为组织工程椎间盘的种子细胞.
배경:목전용작조직공정추간반연구적충자세포주요래원우체외배양적수핵세포,이체외배양적수핵세포전지일정대차후즉출현노화현상,노화적세포실거생장능력불괄우조직공정연구.목적:비교불동대차정상수핵세포적형태학、증식특성이급세포적주요세포외기질성분기인표체정황.방법:이매소화법분리、배양인정상추간반수핵세포,대불동대차수핵세포채용광경、전경등형태학방법진행대체형태화초미결구관찰,채용XTT실험검측불동대차세포간적생장동역학차이,측정수핵세포적활력화세포Ⅱ형효원급당알다당mRNA표체.결과여결론:전3대지전세포형태포만,포장봉부,세포정다각형、단사형,세포내세포기봉부,형태정상,선립체함량소,핵당체함량다,설명세포대사왕성,증식능력강,생장곡선화XTT실험야제시전3대지전수핵세포활성고,증식능력강,세포활력고,세포외기질분비왕성.종전4대기,부분세포형태축점향장사형연화,축점표현위성섬유세포적형태,설명세포개시출현"반조"현상,야칭위노화현상,세포적생장추완,전륙칠대후세포균표현위장사형,조면내질망확장,선립체증다,세포활력강저,세포외기질명현감소,생장처우정체상태.실험결과제시,체외배양조건하,인수핵세포전3대세포형태량호,증식능력강,괄합작위조직공정추간반적충자세포,이세포전4대후증식능력축점감약,불의작위조직공정추간반적충자세포.