湖南农业科学
湖南農業科學
호남농업과학
HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
11期
75-77
,共3页
马铃薯%RT-PCR%病毒检测
馬鈴藷%RT-PCR%病毒檢測
마령서%RT-PCR%병독검측
依据马铃薯X病毒、S病毒、A病毒及卷叶病毒的基因组RNA保守序列设计特异性引物对,从反转录反应中dNTPs浓度、退火温度、PCR反应中Mg2+浓度、循环条件4方面优化三重RT-PCR反应条件,可以同步扩增出上述4种病毒,分别得到620bp(PVX)、435 bp(PVS)、300 bp(PVA)、222 bp(PLRV)大小的扩增片段.结果表明,反转录反应中dNTPs浓度和PCR反应中Mg2+对整个反应的影响最大;其次是退火温度;循环条件对RT-PCR影响较小.优化的三重RT-PCR反应体系为马铃薯病毒的检测提供了一种快速、灵敏、简便的方法,对马铃薯病毒的早期检测和防治提供了有效手段.
依據馬鈴藷X病毒、S病毒、A病毒及捲葉病毒的基因組RNA保守序列設計特異性引物對,從反轉錄反應中dNTPs濃度、退火溫度、PCR反應中Mg2+濃度、循環條件4方麵優化三重RT-PCR反應條件,可以同步擴增齣上述4種病毒,分彆得到620bp(PVX)、435 bp(PVS)、300 bp(PVA)、222 bp(PLRV)大小的擴增片段.結果錶明,反轉錄反應中dNTPs濃度和PCR反應中Mg2+對整箇反應的影響最大;其次是退火溫度;循環條件對RT-PCR影響較小.優化的三重RT-PCR反應體繫為馬鈴藷病毒的檢測提供瞭一種快速、靈敏、簡便的方法,對馬鈴藷病毒的早期檢測和防治提供瞭有效手段.
의거마령서X병독、S병독、A병독급권협병독적기인조RNA보수서렬설계특이성인물대,종반전록반응중dNTPs농도、퇴화온도、PCR반응중Mg2+농도、순배조건4방면우화삼중RT-PCR반응조건,가이동보확증출상술4충병독,분별득도620bp(PVX)、435 bp(PVS)、300 bp(PVA)、222 bp(PLRV)대소적확증편단.결과표명,반전록반응중dNTPs농도화PCR반응중Mg2+대정개반응적영향최대;기차시퇴화온도;순배조건대RT-PCR영향교소.우화적삼중RT-PCR반응체계위마령서병독적검측제공료일충쾌속、령민、간편적방법,대마령서병독적조기검측화방치제공료유효수단.
