广西师范大学学报(自然科学版)
廣西師範大學學報(自然科學版)
엄서사범대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF GUANGXI NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2004年
3期
81-84
,共4页
周俊亚%宾晓芸%彭云滔%唐绍清
週俊亞%賓曉蕓%彭雲滔%唐紹清
주준아%빈효예%팽운도%당소청
生物化学%罗汉果%ISSR%反应体系%遗传多样性
生物化學%囉漢果%ISSR%反應體繫%遺傳多樣性
생물화학%라한과%ISSR%반응체계%유전다양성
以罗汉果(Siraitia grosvenorii)DNA为材料,分析了模板DNA,Mg2+,dNTPs,引物的浓度,Taq DNA聚合酶的用量以及循环次数对ISSR-PCR扩增结果的影响,确立了稳定的、可重复的罗汉果ISSR最佳反应体系和PCR扩增参数:在25μL的PCR反应体系中,含20～50 ng模板DNA,1U Taq酶,1×PCR缓冲液,2.0 mmol/L MgCl2,4种dNTPs各200 μmol/L,0.5μmol/L引物;PCR扩增程序为94℃预变性3 min,接着进行40个循环:94℃变性1 min,52℃退火50 s,72℃延伸2 min,循环结束后72℃延伸7 min.
以囉漢果(Siraitia grosvenorii)DNA為材料,分析瞭模闆DNA,Mg2+,dNTPs,引物的濃度,Taq DNA聚閤酶的用量以及循環次數對ISSR-PCR擴增結果的影響,確立瞭穩定的、可重複的囉漢果ISSR最佳反應體繫和PCR擴增參數:在25μL的PCR反應體繫中,含20～50 ng模闆DNA,1U Taq酶,1×PCR緩遲液,2.0 mmol/L MgCl2,4種dNTPs各200 μmol/L,0.5μmol/L引物;PCR擴增程序為94℃預變性3 min,接著進行40箇循環:94℃變性1 min,52℃退火50 s,72℃延伸2 min,循環結束後72℃延伸7 min.
이라한과(Siraitia grosvenorii)DNA위재료,분석료모판DNA,Mg2+,dNTPs,인물적농도,Taq DNA취합매적용량이급순배차수대ISSR-PCR확증결과적영향,학립료은정적、가중복적라한과ISSR최가반응체계화PCR확증삼수:재25μL적PCR반응체계중,함20～50 ng모판DNA,1U Taq매,1×PCR완충액,2.0 mmol/L MgCl2,4충dNTPs각200 μmol/L,0.5μmol/L인물;PCR확증정서위94℃예변성3 min,접착진행40개순배:94℃변성1 min,52℃퇴화50 s,72℃연신2 min,순배결속후72℃연신7 min.
