湖南师范大学自然科学学报
湖南師範大學自然科學學報
호남사범대학자연과학학보
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NORMALIS HUNANENSIS
2007年
4期
114-118
,共5页
孙运军%袁志明%夏立秋%魏薇%付祖姣%黄璠%丁学知%胡胜标
孫運軍%袁誌明%夏立鞦%魏薇%付祖姣%黃璠%丁學知%鬍勝標
손운군%원지명%하립추%위미%부조교%황번%정학지%호성표
苏云金芽孢杆菌%伴孢晶体%20-kb DNAs%染色体
囌雲金芽孢桿菌%伴孢晶體%20-kb DNAs%染色體
소운금아포간균%반포정체%20-kb DNAs%염색체
已有的研究表明苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)4.0718菌株菱形晶体中含有与原毒素紧密结合的20-kb DNAs,利用PCR-RFLP分析发现在这些20-kb DNAs上含有cry1Aa、cry1Ac、cry2Aa和cry2Ab基因.本研究利用特异引物从4.0718菌株中20-kb DNAs上分别扩增出带有自身调控序列的cry1Ac和cry2Aa基因,并将其分别电转至Bt无晶体菌株Cry-B中获得重组菌株Cry-B(pHC42)和Cry-B(pHC39).SDS-PAGE和透射电镜分析表明这两种重组菌株能够分别产生由130-kDa的Cry1Ac原毒素形成的菱形晶体以及由65-kDa的Cry2Aa原毒素形成的方形晶体.毒力生测的结果显示,这两种菌株的表达产物对棉铃虫(Helicoverpa armigera)幼虫具有预期的杀虫效果.重组菌株分别形成的两种晶体经不同的缓冲液溶解后能释放出与20-kb DNAs紧密结合的原毒素,同时在20-kb DNAs上均可检测到源于Bt染色体的spo0A和nprA基因片段.
已有的研究錶明囌雲金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis,Bt)4.0718菌株蔆形晶體中含有與原毒素緊密結閤的20-kb DNAs,利用PCR-RFLP分析髮現在這些20-kb DNAs上含有cry1Aa、cry1Ac、cry2Aa和cry2Ab基因.本研究利用特異引物從4.0718菌株中20-kb DNAs上分彆擴增齣帶有自身調控序列的cry1Ac和cry2Aa基因,併將其分彆電轉至Bt無晶體菌株Cry-B中穫得重組菌株Cry-B(pHC42)和Cry-B(pHC39).SDS-PAGE和透射電鏡分析錶明這兩種重組菌株能夠分彆產生由130-kDa的Cry1Ac原毒素形成的蔆形晶體以及由65-kDa的Cry2Aa原毒素形成的方形晶體.毒力生測的結果顯示,這兩種菌株的錶達產物對棉鈴蟲(Helicoverpa armigera)幼蟲具有預期的殺蟲效果.重組菌株分彆形成的兩種晶體經不同的緩遲液溶解後能釋放齣與20-kb DNAs緊密結閤的原毒素,同時在20-kb DNAs上均可檢測到源于Bt染色體的spo0A和nprA基因片段.
이유적연구표명소운금아포간균(Bacillus thuringiensis,Bt)4.0718균주릉형정체중함유여원독소긴밀결합적20-kb DNAs,이용PCR-RFLP분석발현재저사20-kb DNAs상함유cry1Aa、cry1Ac、cry2Aa화cry2Ab기인.본연구이용특이인물종4.0718균주중20-kb DNAs상분별확증출대유자신조공서렬적cry1Ac화cry2Aa기인,병장기분별전전지Bt무정체균주Cry-B중획득중조균주Cry-B(pHC42)화Cry-B(pHC39).SDS-PAGE화투사전경분석표명저량충중조균주능구분별산생유130-kDa적Cry1Ac원독소형성적릉형정체이급유65-kDa적Cry2Aa원독소형성적방형정체.독력생측적결과현시,저량충균주적표체산물대면령충(Helicoverpa armigera)유충구유예기적살충효과.중조균주분별형성적량충정체경불동적완충액용해후능석방출여20-kb DNAs긴밀결합적원독소,동시재20-kb DNAs상균가검측도원우Bt염색체적spo0A화nprA기인편단.
