南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
3期
97-101
,共5页
徐世永%丁红梅%孙岩%王蒙%蔡亚飞%刘红林
徐世永%丁紅梅%孫巖%王矇%蔡亞飛%劉紅林
서세영%정홍매%손암%왕몽%채아비%류홍림
慢病毒载体%鸡原生殖细胞(cPGC)%转基因鸡%绿色荧光蛋白
慢病毒載體%鷄原生殖細胞(cPGC)%轉基因鷄%綠色熒光蛋白
만병독재체%계원생식세포(cPGC)%전기인계%록색형광단백
以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为标记基因构建复制缺陷型慢病毒载体生产病毒,以病毒感染不同来源、不同分化特征的细胞,并进行鸡囊胚注射,观测外源基因的表达情况.试验结果表明,在所有类型细胞中均可检测到EGFP较高水平的表达,其中在HeLa、293FT细胞中的转染效率约1×108 TU·mL-1(TU:转染单位),在C127细胞中为5×107 TU·mL-1,在鸡胚胎成纤维细胞(CEF)中约为1×106 TU·mL-1,病毒在鸡原生殖细胞(cPGC)中转染效率最低为1×102 TU·mL-1.病毒的感染可引起细胞表型的不利改变.用该病毒载体注射鸡囊胚获得了可直接活体观察绿色荧光信号的转基因鸡,转基因效率约53%;外源基因在鸡体不同组织如表皮、消化道等器官中检测到不同水平的表达,并表现出不同的分布特征.
以增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)為標記基因構建複製缺陷型慢病毒載體生產病毒,以病毒感染不同來源、不同分化特徵的細胞,併進行鷄囊胚註射,觀測外源基因的錶達情況.試驗結果錶明,在所有類型細胞中均可檢測到EGFP較高水平的錶達,其中在HeLa、293FT細胞中的轉染效率約1×108 TU·mL-1(TU:轉染單位),在C127細胞中為5×107 TU·mL-1,在鷄胚胎成纖維細胞(CEF)中約為1×106 TU·mL-1,病毒在鷄原生殖細胞(cPGC)中轉染效率最低為1×102 TU·mL-1.病毒的感染可引起細胞錶型的不利改變.用該病毒載體註射鷄囊胚穫得瞭可直接活體觀察綠色熒光信號的轉基因鷄,轉基因效率約53%;外源基因在鷄體不同組織如錶皮、消化道等器官中檢測到不同水平的錶達,併錶現齣不同的分佈特徵.
이증강형록색형광단백(EGFP)위표기기인구건복제결함형만병독재체생산병독,이병독감염불동래원、불동분화특정적세포,병진행계낭배주사,관측외원기인적표체정황.시험결과표명,재소유류형세포중균가검측도EGFP교고수평적표체,기중재HeLa、293FT세포중적전염효솔약1×108 TU·mL-1(TU:전염단위),재C127세포중위5×107 TU·mL-1,재계배태성섬유세포(CEF)중약위1×106 TU·mL-1,병독재계원생식세포(cPGC)중전염효솔최저위1×102 TU·mL-1.병독적감염가인기세포표형적불리개변.용해병독재체주사계낭배획득료가직접활체관찰록색형광신호적전기인계,전기인효솔약53%;외원기인재계체불동조직여표피、소화도등기관중검측도불동수평적표체,병표현출불동적분포특정.
