动物学报
動物學報
동물학보
ACTA ZOOLOGICA SINICA
2008年
5期
897-902
,共6页
靳慧君%仲飞%吴凌娟%解民%王微%韩冬梅
靳慧君%仲飛%吳凌娟%解民%王微%韓鼕梅
근혜군%중비%오릉연%해민%왕미%한동매
犬β防御素-1%载体构建%HEK293T细胞%表达
犬β防禦素-1%載體構建%HEK293T細胞%錶達
견β방어소-1%재체구건%HEK293T세포%표체
哺乳动物的β-防御素是一类具有广谱抗微生物活性的阳离子小肽.为了克隆和分析犬β防御素-1基因,并建立一套在HEK293T细胞中高效表达犬β防御素-1的方法,本研究采用RT-PCR方法从犬睾丸组织中扩增出犬β防御素-1(cBD-1)的cDNA基因,并将其克隆到pcDNA3.1A载体中,构建了犬β防御素-1基因的真核表达载体pcDNA3.1A-cBD-1,经磷酸钙介导转染HEK293T细胞进行表达.结果表明:克隆的犬β防御素-1基因序列与已发表序列(GenBank 编号:NM-001024641)的同源性为99.7%.表达犬β防御素-1经Western-blot检测,证明构建的犬β防御素-1基因表达载体能够在真核细胞中表达,表达产物能够分泌到细胞外.为进一步研究犬β防御素的功能奠定了基础.
哺乳動物的β-防禦素是一類具有廣譜抗微生物活性的暘離子小肽.為瞭剋隆和分析犬β防禦素-1基因,併建立一套在HEK293T細胞中高效錶達犬β防禦素-1的方法,本研究採用RT-PCR方法從犬睪汍組織中擴增齣犬β防禦素-1(cBD-1)的cDNA基因,併將其剋隆到pcDNA3.1A載體中,構建瞭犬β防禦素-1基因的真覈錶達載體pcDNA3.1A-cBD-1,經燐痠鈣介導轉染HEK293T細胞進行錶達.結果錶明:剋隆的犬β防禦素-1基因序列與已髮錶序列(GenBank 編號:NM-001024641)的同源性為99.7%.錶達犬β防禦素-1經Western-blot檢測,證明構建的犬β防禦素-1基因錶達載體能夠在真覈細胞中錶達,錶達產物能夠分泌到細胞外.為進一步研究犬β防禦素的功能奠定瞭基礎.
포유동물적β-방어소시일류구유엄보항미생물활성적양리자소태.위료극륭화분석견β방어소-1기인,병건립일투재HEK293T세포중고효표체견β방어소-1적방법,본연구채용RT-PCR방법종견고환조직중확증출견β방어소-1(cBD-1)적cDNA기인,병장기극륭도pcDNA3.1A재체중,구건료견β방어소-1기인적진핵표체재체pcDNA3.1A-cBD-1,경린산개개도전염HEK293T세포진행표체.결과표명:극륭적견β방어소-1기인서렬여이발표서렬(GenBank 편호:NM-001024641)적동원성위99.7%.표체견β방어소-1경Western-blot검측,증명구건적견β방어소-1기인표체재체능구재진핵세포중표체,표체산물능구분비도세포외.위진일보연구견β방어소적공능전정료기출.
