南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2010年
8期
1847-1850
,共4页
谭晶%孙敏%莫小华%陆启瑜%周小虎
譚晶%孫敏%莫小華%陸啟瑜%週小虎
담정%손민%막소화%륙계유%주소호
胰腺癌%RNA干扰%重组质粒%端粒酶%凋亡
胰腺癌%RNA榦擾%重組質粒%耑粒酶%凋亡
이선암%RNA간우%중조질립%단립매%조망
目的 研究重组质粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA转染胰腺癌细胞BxPC-3及其沉默效应.方法 用重组质粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA转染BxPC-3胰腺癌细胞作为研究对象.实验分5组.T1组:pSilencer4.1CMV neo-hTERT1-siRNA;T2组:pSilencer4.1CMV neo-hTERT2-siRNA;Lipofectamine组:Lipofectamine;错配组:pSilence4.1CMV,作为阴性对照:细胞对照组:未做转染的细胞.RT-PCR检测hTERT基因表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Western blot检测细胞端粒酶蛋白表达.结果 与Lipofectamine组、阴性对照组及细胞对照组相比.T1组、T2组BxPC-3细胞中hTERT-mRNA和端粒酶蛋白的表达水平显著下降(P＜0.05).BxPC-3细胞活力明显降低(P＜0.05),G0/G1期细胞比例增高,S期和G2/M期细胞比例降低,细胞凋亡比例显著增加.结论 重组质粒T1和T2能够下调hTERT mRNA和端粒酶蛋白的表达水平,具有良好的RNAi沉默效应.重组质粒T1和T2均明显抑制BxPC-3胰腺癌细胞的生长,使细胞周期发生阻滞,促进细胞凋亡,具有一定的体外抗胰腺癌作用.
目的 研究重組質粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA轉染胰腺癌細胞BxPC-3及其沉默效應.方法 用重組質粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA轉染BxPC-3胰腺癌細胞作為研究對象.實驗分5組.T1組:pSilencer4.1CMV neo-hTERT1-siRNA;T2組:pSilencer4.1CMV neo-hTERT2-siRNA;Lipofectamine組:Lipofectamine;錯配組:pSilence4.1CMV,作為陰性對照:細胞對照組:未做轉染的細胞.RT-PCR檢測hTERT基因錶達,MTT法檢測細胞活力,流式細胞術檢測細胞週期及凋亡,Western blot檢測細胞耑粒酶蛋白錶達.結果 與Lipofectamine組、陰性對照組及細胞對照組相比.T1組、T2組BxPC-3細胞中hTERT-mRNA和耑粒酶蛋白的錶達水平顯著下降(P＜0.05).BxPC-3細胞活力明顯降低(P＜0.05),G0/G1期細胞比例增高,S期和G2/M期細胞比例降低,細胞凋亡比例顯著增加.結論 重組質粒T1和T2能夠下調hTERT mRNA和耑粒酶蛋白的錶達水平,具有良好的RNAi沉默效應.重組質粒T1和T2均明顯抑製BxPC-3胰腺癌細胞的生長,使細胞週期髮生阻滯,促進細胞凋亡,具有一定的體外抗胰腺癌作用.
목적 연구중조질립pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA전염이선암세포BxPC-3급기침묵효응.방법 용중조질립pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA전염BxPC-3이선암세포작위연구대상.실험분5조.T1조:pSilencer4.1CMV neo-hTERT1-siRNA;T2조:pSilencer4.1CMV neo-hTERT2-siRNA;Lipofectamine조:Lipofectamine;착배조:pSilence4.1CMV,작위음성대조:세포대조조:미주전염적세포.RT-PCR검측hTERT기인표체,MTT법검측세포활력,류식세포술검측세포주기급조망,Western blot검측세포단립매단백표체.결과 여Lipofectamine조、음성대조조급세포대조조상비.T1조、T2조BxPC-3세포중hTERT-mRNA화단립매단백적표체수평현저하강(P＜0.05).BxPC-3세포활력명현강저(P＜0.05),G0/G1기세포비례증고,S기화G2/M기세포비례강저,세포조망비례현저증가.결론 중조질립T1화T2능구하조hTERT mRNA화단립매단백적표체수평,구유량호적RNAi침묵효응.중조질립T1화T2균명현억제BxPC-3이선암세포적생장,사세포주기발생조체,촉진세포조망,구유일정적체외항이선암작용.
