生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2005年
6期
602-604
,共3页
闫海涛%马晓芸%董泗建%郑建全%丁日高
閆海濤%馬曉蕓%董泗建%鄭建全%丁日高
염해도%마효예%동사건%정건전%정일고
核因子%p65亚基%GST
覈因子%p65亞基%GST
핵인자%p65아기%GST
将扩增得到的核因子(NF)κB亚基p65基因片段克隆至测序载体pGEM-T,测序验证该序列为预期目的片段后,再将该基因片段克隆至表达载体pGEX-4T2中,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,用GST蛋白亲和柱纯化融合蛋白p65/GST,Western印迹验证该蛋白具有NF-κB抗原活性.结果表明,构建了NF-κB p65/GST融合表达载体,并表达和纯化了NF-κB p65/GST融合蛋白,为进一步研究NF-κB的功能和筛选NF-κB拮抗分子奠定了基础.
將擴增得到的覈因子(NF)κB亞基p65基因片段剋隆至測序載體pGEM-T,測序驗證該序列為預期目的片段後,再將該基因片段剋隆至錶達載體pGEX-4T2中,轉化大腸桿菌BL21,IPTG誘導錶達,用GST蛋白親和柱純化融閤蛋白p65/GST,Western印跡驗證該蛋白具有NF-κB抗原活性.結果錶明,構建瞭NF-κB p65/GST融閤錶達載體,併錶達和純化瞭NF-κB p65/GST融閤蛋白,為進一步研究NF-κB的功能和篩選NF-κB拮抗分子奠定瞭基礎.
장확증득도적핵인자(NF)κB아기p65기인편단극륭지측서재체pGEM-T,측서험증해서렬위예기목적편단후,재장해기인편단극륭지표체재체pGEX-4T2중,전화대장간균BL21,IPTG유도표체,용GST단백친화주순화융합단백p65/GST,Western인적험증해단백구유NF-κB항원활성.결과표명,구건료NF-κB p65/GST융합표체재체,병표체화순화료NF-κB p65/GST융합단백,위진일보연구NF-κB적공능화사선NF-κB길항분자전정료기출.
