重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2007年
1期
12-14,21
,共4页
薛栋%杜成友%杨闯%尹昌生
薛棟%杜成友%楊闖%尹昌生
설동%두성우%양틈%윤창생
神经元素3%供体胰岛%逆转录-多聚酶链反应%免疫组化
神經元素3%供體胰島%逆轉錄-多聚酶鏈反應%免疫組化
신경원소3%공체이도%역전록-다취매련반응%면역조화
目的:研究神经元素3(Ngn3)在不同纯度胰岛细胞中的表达情况,探讨不同纯度胰岛细胞中所携带的干细胞.方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为3组,采用胰管内注入胶原酶消化法分离成年大鼠胰腺,Ⅰ组(n=10):采用2次消化、不纯化的方法获得胰岛;Ⅱ组(n=10):胰岛沉淀物加入25%Ficoll-400纯化,Ⅲ组(n=10):胰岛沉淀物依次加入25%、11%的Ficoll-400纯化.应用免疫组化、逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法进行定位、半定量分析,检测Ngn3在不同纯度胰岛细胞中的表达.结果:Ⅰ组获得胰岛纯度约为43.6%±6.29%,Ⅱ组获得胰岛纯度约为65.3%±4.40%,Ⅲ组获得胰岛纯度约为77.6%±6.36%,各组比较均具有显著性差异(P<0.05).Ngn3在不同纯度胰岛细胞中均有表达,Ⅰ组中Ngn3的蛋白和和核酸水平表达明显高于Ⅱ组、Ⅲ组,Ⅲ组中表达最弱,各组比较均具有显著性差异(P<0.05).结论:Ngn3在不同纯度胰岛细胞中均有表达,在低纯度胰岛细胞中表达最明显,提示低纯度胰岛细胞中可能携带较多的干细胞.
目的:研究神經元素3(Ngn3)在不同純度胰島細胞中的錶達情況,探討不同純度胰島細胞中所攜帶的榦細胞.方法:30隻成年雄性SD大鼠隨機分為3組,採用胰管內註入膠原酶消化法分離成年大鼠胰腺,Ⅰ組(n=10):採用2次消化、不純化的方法穫得胰島;Ⅱ組(n=10):胰島沉澱物加入25%Ficoll-400純化,Ⅲ組(n=10):胰島沉澱物依次加入25%、11%的Ficoll-400純化.應用免疫組化、逆轉錄-多聚酶鏈反應(RT-PCR)方法進行定位、半定量分析,檢測Ngn3在不同純度胰島細胞中的錶達.結果:Ⅰ組穫得胰島純度約為43.6%±6.29%,Ⅱ組穫得胰島純度約為65.3%±4.40%,Ⅲ組穫得胰島純度約為77.6%±6.36%,各組比較均具有顯著性差異(P<0.05).Ngn3在不同純度胰島細胞中均有錶達,Ⅰ組中Ngn3的蛋白和和覈痠水平錶達明顯高于Ⅱ組、Ⅲ組,Ⅲ組中錶達最弱,各組比較均具有顯著性差異(P<0.05).結論:Ngn3在不同純度胰島細胞中均有錶達,在低純度胰島細胞中錶達最明顯,提示低純度胰島細胞中可能攜帶較多的榦細胞.
목적:연구신경원소3(Ngn3)재불동순도이도세포중적표체정황,탐토불동순도이도세포중소휴대적간세포.방법:30지성년웅성SD대서수궤분위3조,채용이관내주입효원매소화법분리성년대서이선,Ⅰ조(n=10):채용2차소화、불순화적방법획득이도;Ⅱ조(n=10):이도침정물가입25%Ficoll-400순화,Ⅲ조(n=10):이도침정물의차가입25%、11%적Ficoll-400순화.응용면역조화、역전록-다취매련반응(RT-PCR)방법진행정위、반정량분석,검측Ngn3재불동순도이도세포중적표체.결과:Ⅰ조획득이도순도약위43.6%±6.29%,Ⅱ조획득이도순도약위65.3%±4.40%,Ⅲ조획득이도순도약위77.6%±6.36%,각조비교균구유현저성차이(P<0.05).Ngn3재불동순도이도세포중균유표체,Ⅰ조중Ngn3적단백화화핵산수평표체명현고우Ⅱ조、Ⅲ조,Ⅲ조중표체최약,각조비교균구유현저성차이(P<0.05).결론:Ngn3재불동순도이도세포중균유표체,재저순도이도세포중표체최명현,제시저순도이도세포중가능휴대교다적간세포.