中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2007年
3期
259-263
,共5页
裘玮%黄倩%李惠明%王丰%伍瑛%陈霞芳%易苗英
裘瑋%黃倩%李惠明%王豐%伍瑛%陳霞芳%易苗英
구위%황천%리혜명%왕봉%오영%진하방%역묘영
神经胶质瘤%移植瘤模型%C6-gfp细胞系%瞬时转染%稳定转染%绿色荧光蛋白
神經膠質瘤%移植瘤模型%C6-gfp細胞繫%瞬時轉染%穩定轉染%綠色熒光蛋白
신경효질류%이식류모형%C6-gfp세포계%순시전염%은정전염%록색형광단백
目的:建立一种新的可动态观察肿瘤细胞生长的大鼠神经胶质瘤原位移植瘤模型.方法:利用脂质体将含有强化绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)基因的真核表达质粒pEGFP-N1转染大鼠神经胶质瘤C6细胞,经G418筛选及亚克隆,获取稳定表达EGFP的细胞系C6-gfp.采用CCK-8试剂盒检测C6及C6-gfp细胞增殖情况;将C6-gfp细胞接种于Wistar大鼠颅内,通过B超、大体标本、荧光体视镜、H-E染色和免疫组化观察颅内成瘤情况及瘤组织中绿色荧光蛋白的表达.结果:流式细胞术分析体外培养的C6-gfp细胞97.7%产生绿色荧光;C6-gfp细胞与亲代C6细胞相比,生长曲线无明显不同(P》0.05).C6-gfp接种于颅内3周后成瘤率达70%;利用B超可动态观察肿瘤生长,利用荧光体视镜可见肿瘤组织发出绿色荧光,可与周围正常组织区别.H-E染色可见肿瘤细胞核大,染色深,核分裂明显,瘤内有很多新生血管.免疫组化可见GFP阳性细胞染色深浅不一.结论:成功构建了能稳定高水平表达EGFP的大鼠神经胶质瘤C6-gfp细胞株,其生物学行为未发生改变,能在同系大鼠颅内成瘤.该模型为神经胶质瘤防治研究提供了良好的基础.
目的:建立一種新的可動態觀察腫瘤細胞生長的大鼠神經膠質瘤原位移植瘤模型.方法:利用脂質體將含有彊化綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)基因的真覈錶達質粒pEGFP-N1轉染大鼠神經膠質瘤C6細胞,經G418篩選及亞剋隆,穫取穩定錶達EGFP的細胞繫C6-gfp.採用CCK-8試劑盒檢測C6及C6-gfp細胞增殖情況;將C6-gfp細胞接種于Wistar大鼠顱內,通過B超、大體標本、熒光體視鏡、H-E染色和免疫組化觀察顱內成瘤情況及瘤組織中綠色熒光蛋白的錶達.結果:流式細胞術分析體外培養的C6-gfp細胞97.7%產生綠色熒光;C6-gfp細胞與親代C6細胞相比,生長麯線無明顯不同(P》0.05).C6-gfp接種于顱內3週後成瘤率達70%;利用B超可動態觀察腫瘤生長,利用熒光體視鏡可見腫瘤組織髮齣綠色熒光,可與週圍正常組織區彆.H-E染色可見腫瘤細胞覈大,染色深,覈分裂明顯,瘤內有很多新生血管.免疫組化可見GFP暘性細胞染色深淺不一.結論:成功構建瞭能穩定高水平錶達EGFP的大鼠神經膠質瘤C6-gfp細胞株,其生物學行為未髮生改變,能在同繫大鼠顱內成瘤.該模型為神經膠質瘤防治研究提供瞭良好的基礎.
목적:건립일충신적가동태관찰종류세포생장적대서신경효질류원위이식류모형.방법:이용지질체장함유강화록색형광단백(enhanced green fluorescence protein,EGFP)기인적진핵표체질립pEGFP-N1전염대서신경효질류C6세포,경G418사선급아극륭,획취은정표체EGFP적세포계C6-gfp.채용CCK-8시제합검측C6급C6-gfp세포증식정황;장C6-gfp세포접충우Wistar대서로내,통과B초、대체표본、형광체시경、H-E염색화면역조화관찰로내성류정황급류조직중록색형광단백적표체.결과:류식세포술분석체외배양적C6-gfp세포97.7%산생록색형광;C6-gfp세포여친대C6세포상비,생장곡선무명현불동(P》0.05).C6-gfp접충우로내3주후성류솔체70%;이용B초가동태관찰종류생장,이용형광체시경가견종류조직발출록색형광,가여주위정상조직구별.H-E염색가견종류세포핵대,염색심,핵분렬명현,류내유흔다신생혈관.면역조화가견GFP양성세포염색심천불일.결론:성공구건료능은정고수평표체EGFP적대서신경효질류C6-gfp세포주,기생물학행위미발생개변,능재동계대서로내성류.해모형위신경효질류방치연구제공료량호적기출.
