农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2008年
1期
85-89
,共5页
李鹏%仇妍虹%李腩%郑其升%曹瑞兵%周斌%张秋伟%陈溥言
李鵬%仇妍虹%李腩%鄭其升%曹瑞兵%週斌%張鞦偉%陳溥言
리붕%구연홍%리남%정기승%조서병%주빈%장추위%진부언
家蝇防御素抗菌肽%突变体%抑菌活性%防御素
傢蠅防禦素抗菌肽%突變體%抑菌活性%防禦素
가승방어소항균태%돌변체%억균활성%방어소
采用PCR定点突变技术,将家蝇(Musca domestica)防御素抗菌肽成熟肽段的基因(des-hf)第32位氨基酸残基由甘氨酸(G)突变为带正电荷的精氨酸(R),构成第一个突变体des-hf-MU1;采用同样的方法在des-hf基因的C端加上6个带有正电荷的赖氨酸(K),构成第2个突变体des-hf-MU2.采用毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统对上述2个突变体进行表达.抗菌特性表明,抗菌肽突变体对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有较好的抑菌活性.琼脂孔扩散法检测des-hf-MU1和des-hf-MU2的抑菌效价比des-hf分别提高了2.4和8.0倍.酸稳定性试验显示,抗菌肽突变体在pH值为5～6时活性最高,热稳定性试验显示des-hf-MU1和des-hf-MU2 100℃加热10 min后仍具有抑菌活性.显示了两抗菌肽突变体具有良好的应用前景.
採用PCR定點突變技術,將傢蠅(Musca domestica)防禦素抗菌肽成熟肽段的基因(des-hf)第32位氨基痠殘基由甘氨痠(G)突變為帶正電荷的精氨痠(R),構成第一箇突變體des-hf-MU1;採用同樣的方法在des-hf基因的C耑加上6箇帶有正電荷的賴氨痠(K),構成第2箇突變體des-hf-MU2.採用畢赤酵母(Pichia pastoris)錶達繫統對上述2箇突變體進行錶達.抗菌特性錶明,抗菌肽突變體對金黃色葡萄毬菌(Staphylococcus aureus)有較好的抑菌活性.瓊脂孔擴散法檢測des-hf-MU1和des-hf-MU2的抑菌效價比des-hf分彆提高瞭2.4和8.0倍.痠穩定性試驗顯示,抗菌肽突變體在pH值為5～6時活性最高,熱穩定性試驗顯示des-hf-MU1和des-hf-MU2 100℃加熱10 min後仍具有抑菌活性.顯示瞭兩抗菌肽突變體具有良好的應用前景.
채용PCR정점돌변기술,장가승(Musca domestica)방어소항균태성숙태단적기인(des-hf)제32위안기산잔기유감안산(G)돌변위대정전하적정안산(R),구성제일개돌변체des-hf-MU1;채용동양적방법재des-hf기인적C단가상6개대유정전하적뢰안산(K),구성제2개돌변체des-hf-MU2.채용필적효모(Pichia pastoris)표체계통대상술2개돌변체진행표체.항균특성표명,항균태돌변체대금황색포도구균(Staphylococcus aureus)유교호적억균활성.경지공확산법검측des-hf-MU1화des-hf-MU2적억균효개비des-hf분별제고료2.4화8.0배.산은정성시험현시,항균태돌변체재pH치위5～6시활성최고,열은정성시험현시des-hf-MU1화des-hf-MU2 100℃가열10 min후잉구유억균활성.현시료량항균태돌변체구유량호적응용전경.
