暨南大学学报（自然科学与医学版）
暨南大學學報（自然科學與醫學版）
기남대학학보（자연과학여의학판）
JOURNAL OF JINAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE & MEDICINE EDITION）
2008年
6期
562-566,577
,共6页
韩捷%施焕敬%徐丽慧%卢宏松%何贤辉
韓捷%施煥敬%徐麗慧%盧宏鬆%何賢輝
한첩%시환경%서려혜%로굉송%하현휘
存活索%真核准表达%分泌型%肿瘤相关抗原
存活索%真覈準錶達%分泌型%腫瘤相關抗原
존활색%진핵준표체%분비형%종류상관항원
目的:构建含6个组氨酸标签(His6)的小鼠存活素(Survivin)融台蛋白的真核表达载体,及其在真核细胞中的表达.方法:根据小鼠Surivin序列设计引物,经过RT-PCR克隆5urvivin的Cdna并进一步构建分泌型Sar-vivin的真核表达载体,经测序鉴定后在大肠杆菌中扩增在HeLa细胞中表达;以金属离子螯合层析富集,再用免疫印迹法鉴定.结果:克隆到Surivin编码区全长序列,经DNA测序后证明与已报道序列相同.构建氨基端融合小鼠IL-2信号肽,羧基端带有His6标签的Survivin融合蛋白的真棱表达载体,在HeLa细胞中转染成功并且表达;细胞上清经HisTmp HP柱层析富集后,进行免疫印迹分析,表明该融合蛋白以分泌型方式在HeLa细胞中表达.结论:成功克隆Survivin的Cdna,并构建其分泌型真核表达载体.
目的:構建含6箇組氨痠標籤(His6)的小鼠存活素(Survivin)融檯蛋白的真覈錶達載體,及其在真覈細胞中的錶達.方法:根據小鼠Surivin序列設計引物,經過RT-PCR剋隆5urvivin的Cdna併進一步構建分泌型Sar-vivin的真覈錶達載體,經測序鑒定後在大腸桿菌中擴增在HeLa細胞中錶達;以金屬離子螯閤層析富集,再用免疫印跡法鑒定.結果:剋隆到Surivin編碼區全長序列,經DNA測序後證明與已報道序列相同.構建氨基耑融閤小鼠IL-2信號肽,羧基耑帶有His6標籤的Survivin融閤蛋白的真稜錶達載體,在HeLa細胞中轉染成功併且錶達;細胞上清經HisTmp HP柱層析富集後,進行免疫印跡分析,錶明該融閤蛋白以分泌型方式在HeLa細胞中錶達.結論:成功剋隆Survivin的Cdna,併構建其分泌型真覈錶達載體.
목적:구건함6개조안산표첨(His6)적소서존활소(Survivin)융태단백적진핵표체재체,급기재진핵세포중적표체.방법:근거소서Surivin서렬설계인물,경과RT-PCR극륭5urvivin적Cdna병진일보구건분비형Sar-vivin적진핵표체재체,경측서감정후재대장간균중확증재HeLa세포중표체;이금속리자오합층석부집,재용면역인적법감정.결과:극륭도Surivin편마구전장서렬,경DNA측서후증명여이보도서렬상동.구건안기단융합소서IL-2신호태,최기단대유His6표첨적Survivin융합단백적진릉표체재체,재HeLa세포중전염성공병차표체;세포상청경HisTmp HP주층석부집후,진행면역인적분석,표명해융합단백이분비형방식재HeLa세포중표체.결론:성공극륭Survivin적Cdna,병구건기분비형진핵표체재체.
