CAJ | 학술논문

针对体外静态培养方法的缺点,采用旋转生物反应器培养组织工程气管软骨,探讨工程化软骨合适的体外培养条件.选用大鼠剑突软骨细胞种植到DegraPol管状支架上,然后分别于传统静态培养和生物反应器内培养.于体外培养3周和6周后,取出软骨细胞-DegraPol支架复合物,以噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性,GAG浓度测定细胞外基质分泌情况,应力-应变机械力学方法测定最大应变和应力的变化,并制备扫描电镜标本观察软骨细胞在DegraP01支架中培养后的超微结构.体外培养3周应用MTT法测定A值分别为:静态培养的细胞-支架复合物组0.12±0.01,生物反应器组0.17±0.05(每组n=6).GAG浓度测定静态培养组为(0.14±0.03) μg/mg,生物反应器组为(0.22±O.03) μg/mg(每组n=6).应力-应变机械力学测定结果为,体外培养3周应变值:生物反应器组为(3.53±0.91),静态培养组为(1.71±0.13).应力值生物反应器组为(0.33±0.04) MPa,静态培养组为(0.26±0.01) MPa.体外培养6周应变值:生物反应器组为(0.57±0.10),静态培养组为(0.48±0.07),应力值生物反应器组为(0.16±0.02) MPa,静态培养组为(0.09±0.02) MPa(每组n=4).扫描电镜观察显示生物反应器组获得更好的软骨样结构和更多的细胞外基质.应用旋转生物反应器能够提供适宜的机械应力刺激,可作为体外构建组织工程化气管软骨的可行的培养方法.
침대체외정태배양방법적결점,채용선전생물반응기배양조직공정기관연골,탐토공정화연골합괄적체외배양조건.선용대서검돌연골세포충식도DegraPol관상지가상,연후분별우전통정태배양화생물반응기내배양.우체외배양3주화6주후,취출연골세포-DegraPol지가복합물,이새서람(MTT)법측정세포증식활성,GAG농도측정세포외기질분비정황,응력-응변궤계역학방법측정최대응변화응력적변화,병제비소묘전경표본관찰연골세포재DegraP01지가중배양후적초미결구.체외배양3주응용MTT법측정A치분별위:정태배양적세포-지가복합물조0.12±0.01,생물반응기조0.17±0.05(매조n=6).GAG농도측정정태배양조위(0.14±0.03) μg/mg,생물반응기조위(0.22±O.03) μg/mg(매조n=6).응력-응변궤계역학측정결과위,체외배양3주응변치:생물반응기조위(3.53±0.91),정태배양조위(1.71±0.13).응력치생물반응기조위(0.33±0.04) MPa,정태배양조위(0.26±0.01) MPa.체외배양6주응변치:생물반응기조위(0.57±0.10),정태배양조위(0.48±0.07),응력치생물반응기조위(0.16±0.02) MPa,정태배양조위(0.09±0.02) MPa(매조n=4).소묘전경관찰현시생물반응기조획득경호적연골양결구화경다적세포외기질.응용선전생물반응기능구제공괄의적궤계응력자격,가작위체외구건조직공정화기관연골적가행적배양방법.