南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2010年
7期
1558-1561
,共4页
王洁%张颖骞%钟光明%余平
王潔%張穎鶱%鐘光明%餘平
왕길%장영건%종광명%여평
沙眼衣原体%OmcB%抗原性
沙眼衣原體%OmcB%抗原性
사안의원체%OmcB%항원성
目的 探讨重组沙眼衣原体OmcB基因C端编码蛋白的抗原性,为衣原体感染性疾病的早期诊断和疫苗研究提供新的靶标.方法 采用PCR技术从沙眼农原体基因组中扩增OmcB的C端(T270-Y553)序列,并构建pGEX-6p-CtOmcBc原核表达质粒,转染大肠杆菌XL-1blue,IPTG诱导表达重组GST-OmcBc融合蛋白;收集120例Ct生殖道感染患者血清,以CtD血清型灭活的EB分别于皮下和腹腔免疫7只新西兰大白兔和5只Balb/C小鼠,以Ct D血清型活的EB滴鼻感染9只Balb/C小鼠,分别收集这些动物免疫血清;间接免疫荧光法检测各血清中抗农原体特异性抗体的效价;ELISA法检测重组GST-OmcBc融合蛋白与各免疫血清的反应性.结果 成功构建了pGEX-6p-Ct OmcBc原核表达质粒,经测序显示插入基因长度为852 bp,编码284个氨基酸.IPTG成功诱导表达了重组GST-OmcBc融合蛋白,其分子质量约为57kDa;所制备和收集的各免疫血清均含高滴度抗衣原体特异性抗体;ELISA结果显示重组GST-OmcBc融合蛋白对各免疫血清均具有强的抗原性.结论 Ct OmcBc是衣原体的一个免疫优势蛋白,重组GST-OmcBc融合蛋白的成功表达及其良好的抗原性为进一步开展衣原体感染早期诊断研究和疫苗的研发奠定了基础.
目的 探討重組沙眼衣原體OmcB基因C耑編碼蛋白的抗原性,為衣原體感染性疾病的早期診斷和疫苗研究提供新的靶標.方法 採用PCR技術從沙眼農原體基因組中擴增OmcB的C耑(T270-Y553)序列,併構建pGEX-6p-CtOmcBc原覈錶達質粒,轉染大腸桿菌XL-1blue,IPTG誘導錶達重組GST-OmcBc融閤蛋白;收集120例Ct生殖道感染患者血清,以CtD血清型滅活的EB分彆于皮下和腹腔免疫7隻新西蘭大白兔和5隻Balb/C小鼠,以Ct D血清型活的EB滴鼻感染9隻Balb/C小鼠,分彆收集這些動物免疫血清;間接免疫熒光法檢測各血清中抗農原體特異性抗體的效價;ELISA法檢測重組GST-OmcBc融閤蛋白與各免疫血清的反應性.結果 成功構建瞭pGEX-6p-Ct OmcBc原覈錶達質粒,經測序顯示插入基因長度為852 bp,編碼284箇氨基痠.IPTG成功誘導錶達瞭重組GST-OmcBc融閤蛋白,其分子質量約為57kDa;所製備和收集的各免疫血清均含高滴度抗衣原體特異性抗體;ELISA結果顯示重組GST-OmcBc融閤蛋白對各免疫血清均具有彊的抗原性.結論 Ct OmcBc是衣原體的一箇免疫優勢蛋白,重組GST-OmcBc融閤蛋白的成功錶達及其良好的抗原性為進一步開展衣原體感染早期診斷研究和疫苗的研髮奠定瞭基礎.
목적 탐토중조사안의원체OmcB기인C단편마단백적항원성,위의원체감염성질병적조기진단화역묘연구제공신적파표.방법 채용PCR기술종사안농원체기인조중확증OmcB적C단(T270-Y553)서렬,병구건pGEX-6p-CtOmcBc원핵표체질립,전염대장간균XL-1blue,IPTG유도표체중조GST-OmcBc융합단백;수집120례Ct생식도감염환자혈청,이CtD혈청형멸활적EB분별우피하화복강면역7지신서란대백토화5지Balb/C소서,이Ct D혈청형활적EB적비감염9지Balb/C소서,분별수집저사동물면역혈청;간접면역형광법검측각혈청중항농원체특이성항체적효개;ELISA법검측중조GST-OmcBc융합단백여각면역혈청적반응성.결과 성공구건료pGEX-6p-Ct OmcBc원핵표체질립,경측서현시삽입기인장도위852 bp,편마284개안기산.IPTG성공유도표체료중조GST-OmcBc융합단백,기분자질량약위57kDa;소제비화수집적각면역혈청균함고적도항의원체특이성항체;ELISA결과현시중조GST-OmcBc융합단백대각면역혈청균구유강적항원성.결론 Ct OmcBc시의원체적일개면역우세단백,중조GST-OmcBc융합단백적성공표체급기량호적항원성위진일보개전의원체감염조기진단연구화역묘적연발전정료기출.
