生态科学
生態科學
생태과학
ECOLOGIC SCIENCE
2011年
2期
174-177
,共4页
枯草芽孢杆菌%Mn-SOD%原核表达%活力
枯草芽孢桿菌%Mn-SOD%原覈錶達%活力
고초아포간균%Mn-SOD%원핵표체%활력
为了实现Mn-SOD基因在大肠杆菌(E.coli)中的可溶性表达,根据枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168sodA核酸序列设计引物,以枯草芽孢杆菌ATCC 9372基因组为模板,PCR扩增获得了Mn-SOD基因.将此基因重组至原核表达载体pET-28a,构建含Mn-SOD基因的重组表达质粒,并转化至大肠杆菌BL21(DE3).异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得Mn-SOD,蛋白分子量约为26kD,占全菌蛋白的45.6%.改良的连苯三酚自氧化法测定SOD活力,菌体可溶性总蛋白SOD比活为51.09U·mg<'-1>,是对照组的4.84倍.枯草芽孢杆菌ATCC 9372 Mn-SOD基因在大肠杆菌BL21 (DE3)中首次成功表达,产物具有较高的可溶性和活性,为大量制备Mn-SOD奠定了基础.
為瞭實現Mn-SOD基因在大腸桿菌(E.coli)中的可溶性錶達,根據枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)168sodA覈痠序列設計引物,以枯草芽孢桿菌ATCC 9372基因組為模闆,PCR擴增穫得瞭Mn-SOD基因.將此基因重組至原覈錶達載體pET-28a,構建含Mn-SOD基因的重組錶達質粒,併轉化至大腸桿菌BL21(DE3).異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導錶達穫得Mn-SOD,蛋白分子量約為26kD,佔全菌蛋白的45.6%.改良的連苯三酚自氧化法測定SOD活力,菌體可溶性總蛋白SOD比活為51.09U·mg<'-1>,是對照組的4.84倍.枯草芽孢桿菌ATCC 9372 Mn-SOD基因在大腸桿菌BL21 (DE3)中首次成功錶達,產物具有較高的可溶性和活性,為大量製備Mn-SOD奠定瞭基礎.
위료실현Mn-SOD기인재대장간균(E.coli)중적가용성표체,근거고초아포간균(Bacillus subtilis)168sodA핵산서렬설계인물,이고초아포간균ATCC 9372기인조위모판,PCR확증획득료Mn-SOD기인.장차기인중조지원핵표체재체pET-28a,구건함Mn-SOD기인적중조표체질립,병전화지대장간균BL21(DE3).이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도표체획득Mn-SOD,단백분자량약위26kD,점전균단백적45.6%.개량적련분삼분자양화법측정SOD활력,균체가용성총단백SOD비활위51.09U·mg<'-1>,시대조조적4.84배.고초아포간균ATCC 9372 Mn-SOD기인재대장간균BL21 (DE3)중수차성공표체,산물구유교고적가용성화활성,위대량제비Mn-SOD전정료기출.
